Sephadex G25（C-BETB002）應用實例說明

Sephadex G25是一種葡聚糖層析培養基。在Sephadex G25中，提取物的交聯度決定了大分子滲透珠的程度。大分子被排除在外，而小分子根據其不同的尺寸在不同程度上進入珠粒。因此，大分子首先離開柱子，然后是小分子。根據不同的粒度，Sephadex G25有四個等級（粗、中、細和超細）。

艾美捷Sephadex G25：

Cat #: C-BETB002

Size:

1. Resin: 10 mL, 50 mL, 100 mL, 250 mL, 500 mL, 1 L;

2. Prepacked Column: 5mL-Column

Storage: 20% ethanol or 0.01 M NaOH, 4-30°C

Sephadex G25應用實例：
色譜柱：XK16/30脫鹽柱，柱高25cm（Sephadex G25M）。

平衡緩沖液：20mM PB+150mM NaCl，pH 7.0，通過0.45μm過濾器過濾。

流速：2mL/min。

柱平衡：將色譜柱連接到純化儀器上，用2-3柱體積（CV）的平衡緩沖液洗滌脫鹽柱。

樣品裝載：添加1 mL樣品，以最大限度地延長色譜柱的使用壽命，樣品應在裝載前進行澄清，例如以10000 g離心10分鐘或通過0.45μm過濾器過濾。洗脫：用平衡緩沖液洗滌脫鹽柱至少2 CV，流速不超過建議的最大流速。

色譜圖如下：

圖1 5mL柱脫鹽色譜圖

使用方法：

Sephadex G25通常用于不同分子量蛋白質的脫鹽、緩沖液交換和分離。樣品體積根據具體應用而變化，對于緩沖液交換或脫鹽，它可以高達柱體積的20%。

Sephadex G25培養基需要第一次溶脹。放入過量的去離子水中并溶脹，例如，加入100-150 mL水使10g介質溶脹，并使其溶脹至少3小時。也可以通過使用水浴加速溶脹（例如，在90°C下溶脹1小時），但應避免劇烈攪拌以防止凝膠破裂。

脫鹽介質&脫鹽柱相關研究：

貨號 名稱

C-BETB002-100mL Sephadex G25, 100mL

C-BETB002-10mL Sephadex G25, 10mL

C-BETB002-1L Sephadex G25, 1L

C-BETB002-250mL Sephadex G25, 250mL

C-BETB002-500mL Sephadex G25, 500mL

C-BETB002-50mL Sephadex G25, 50mL

C-BETB002-5mL-Column Sephadex G25, 5mL Prepacked Column

應用：利用分子篩作用，進行緩沖液交換、脫鹽，分離并去除小分子; 工業脫鹽。

備注：按凝膠介質粒徑不同，Sephadex G25系列介質可分為四類，分別為：Sephadex G25粗， Sephadex G25中等，Sephadex G25細和 Sephadex G25超細，上表的Sephadex G25屬于Sephadex G25（M）中等。  

https://www.amyjet.com/products/C-BETB002-100mL.shtml