艾美捷人免疫球蛋白IgG4 ELISA試劑盒，雙抗體“三明治”技術

上一篇 / 下一篇 2022-10-17 15:07:56/ 個人分類：生化試劑

艾美捷人免疫球蛋白IgG4 ELISA試劑盒背景：

人類治療性抗體已成為越來越常見的成分藥物的早期發現和開發組合以及生物技術產業。作為這些藥物臨床前毒理學評估的一部分它們通常在非人類靈長類動物中進行測試，主要是在恒河猴或食蟹猴。為了評估人體的藥代動力學猴血清中的抗體，必須進行能夠區分實驗引入的人IgG和內源性IgG猴IgG。1,2歷史上，由于高度這些免疫球蛋白物種之間的同源性。1,2 Cayman開發了ELISA格式可準確測量猴血清中的人IgG，用于治療性人抗體的藥代動力學分析。

絕大多數臨床批準的治療性人類抗體是IgG1和IgG4等型。3由于其“效應器”，IgG1更常用功能：1）與效應白細胞上的Fc受體高親和力結合2）它修復了補碼。因此，IgG1介導抗體誘導的細胞毒性（ADCC）以及補體介導的細胞毒性。4.5部分在治療應用中，ADCC和補體激活均不理想在這種情況下，通常采用IgG4同型。4.5 Cayman提供ELISA試劑盒

專為檢測人類IgG1、人類IgG2或人類IgG4。

艾美捷人免疫球蛋白IgG4 ELISA試劑盒是一種免疫測定法（即夾心法），可用于定量血漿和血清中的人類 IgG4，而無需事先進行樣品純化。標準曲線范圍為 7.8-500 ng/ml，定量下限 (LLOQ) 為 7.8 ng/ml。該測定已在食蟹猴、恒河猴、小鼠和大鼠的血清中得到驗證。

這種免疫測定法基于雙抗體“三明治”技術。隨套件提供的微孔板的每個孔都涂有人IgG特異性抗體。這種抗體將結合任何引入的人類IgG到井里。與辣根過氧化物酶（HRP）結合的第二抗體，它也能識別人類IgG，被添加到形成“三明治”的井中。這個“三明治”固定在平板上，多余的試劑被洗掉。

人IgG的濃度通過測定酶使用顯色底物3,3'，5,5'-四甲基聯苯胺的HRP活性（TMB）。經過足夠的時間后，用酸停止反應，形成能夠在450 nm處測量的具有明顯黃色的產品。這個顏色的強度與結合抗體HRP結合物的量成正比，而結合抗體HRP-結合物的數量與人IgG4的濃度成正比吸光度∝ [抗人IgG HRP]∝ [IgG4]。