溫補腎陽藥對激素依賴性腎陽虛動物肝線粒體蛋白質組影響的研究

摘要:目的　利用雙向凝膠內差異顯示電泳技術,分析溫補腎陽藥對激素依賴性腎陽虛動物肝線粒體蛋白質組影響。方法　正常大鼠、腎陽虛大鼠及溫補腎陽藥治療大鼠肝線粒體蛋白質樣品分別用熒光染料Cy2, Cy3, Cy5標記,經雙向電泳后用不同波長光激發掃描后得到不同樣品的蛋白質組圖譜,經DeCyder軟件分析,以腎陽虛動物與正常動物肝線粒體蛋白質相差112倍以上的蛋白作為差異蛋白,共獲得16個差異蛋白質,經質譜測定和與蛋白質文庫比對,其中11個蛋白質得到鑒定。結果　腎陽虛動物由于腎上腺皮質功能受損,引起熱休克蛋白60和70含量增加,可能起到調整處于應激狀態的細胞存活、保護細胞免受損傷的作用;腎陽虛動物糖代謝和脂代謝功能降低,而蛋白質代謝和核酸代謝功能增強,表現為二氫硫辛酰胺脫氫酶和脂酰輔酶A脫氫酶活性降低,而肌氨酸脫氫酶、氨甲酰磷酸合成酶和亞硫酸氧化酶活性增加;腎陽虛動物由于三羧酸循環和脂肪酸β2氧化功能障礙,引起ATP合酶、醛脫氫酶和NADH脫氫酶活性代償性增加,試圖通過增加ATP的產量以緩解能量代謝的不足;但腎陽虛動物由于鳥氨酸氨基轉移酶活性降低,導致儲存能量的肌酸合成降低,使產生的ATP大部分通過熱能形式消耗掉,從而導致腎陽虛的臨床虛寒癥狀。應用溫補腎陽藥治療后使熱休克蛋白60更趨增加,可能加強對細胞的保護作用;溫補腎陽藥增加二氫硫辛酰胺脫氫酶的活性,可通過改善糖代謝和促進三羧酸循環功能使機體的能量代謝增強;溫補腎陽藥還可以通過增加ATP合酶和醛脫氫酶的含量,使ATP的產量增加,緩解能量代謝功能障礙。結論　溫補腎陽藥可以通過調整線粒體內多種與能量代謝相關蛋白質表達而起到治療腎陽虛的作用。