血液中酒精含量的分析——氣相色譜法

【概述】

近年來酒駕、醉駕造成的交通事故不斷增加，后果嚴重。快速準確分析出司機血液酒精的含量，是極為重要的任務。本方法依據標準GA/T 842-2019《血液酒精含量的檢驗方法》，采用單全自動頂空進樣，雙毛細柱雙檢測器對同一樣品進行同時分析，儀器配置合理，操作簡單，適合各級GA部門，醫院司法鑒定配備。

方法原理

本方法利用酒精(以下稱乙醇)的易揮發性，以叔丁醇為內標，用頂空氣相色譜火焰離子化檢測器進行檢測；經與平行操作的乙醇標準品比較，以保留時間或相對保留時間定性，用內標法以乙醇對內標物的峰面積比進行定量分析。

主要儀器配置

1）普瑞儀器GC9280氣相色譜儀，EPC/EFC（電子壓力/流量控制），雙FID檢測器；

2）全自動頂空進樣器；

3）DB-ALC1色譜柱：30m×0.32mm×1.8μm；

4）DB-ALC2色譜柱：30m×0.32mm×1.2μm；

5）PR3000色譜工作站軟件;

6）乙醇標準工作溶液：5、20、40、80、100、200mg/100mL；

7）叔丁醇內標工作溶液：4mg/100mL。

實驗方法

3.1 樣品處理方法

取0.10mL待測全血及0.50mL叔丁醇內標工作液加入樣品瓶內，蓋上硅橡膠墊，用密封鉗加封鋁帽，混勻，待測。

3.2 標準曲線繪制

配置系列濃度的乙醇標準工作溶液。

取系列濃度的各標準工作溶液0.10 mL及叔丁醇內標工作溶液0.50 mL，分別加入樣品瓶內，制備校準曲線的乙醇標準工作溶液系列濃度為5、20、40、80、100、200 mg/100mL。

3.3 實驗條件

柱箱：恒溫50℃；進樣器：250℃；FID：250℃；

柱前壓：0.04MPa；頂空溫度：65℃；頂空時間：10min。

4、實驗結果

4.1 標準工作液色譜圖

4.1.1  5mg/100mL 乙醇標準工作液色譜圖

圖1. DB-ALC1色譜柱5mg/100mL標準工作液色譜圖

圖2. DB-ALC2色譜柱5mg/100mL標準工作液色譜圖

4.1.2  20mg/100mL 乙醇標準工作液色譜圖

圖3. DB-ALC1色譜柱20mg/100mL標準工作液色譜圖

圖4. DB-ALC2色譜柱20mg/100mL標準工作液色譜圖

4.1.3  80mg/100mL 乙醇標準工作液色譜圖

圖5. DB-ALC1色譜柱80mg/100mL標準工作液色譜圖

圖6. DB-ALC2色譜柱80mg/100mL標準工作液色譜圖

4.2 校準曲線

4.2.1  DB-ALC1色譜柱乙醇校準曲線為：y=-0.0245+0.0121*X，線性相關系數r=0.9995

4.2.2 DB-ALC2色譜柱乙醇校準曲線為：

y=-0.00227+0.0122*X，線性相關系數r=0.9996

4.3 定量及相對偏差計算

4.3.1  定量結果計算：

根據案件樣品中乙醇及內標叔丁醇峰面積值，按照式（1）計算案件樣品中的乙醇含量X。      

式中：X——案件樣品中的乙醇含量，單位為毫克每100毫升（mg/100 mL）；Y——案件樣品中乙醇及內標叔丁醇的峰面積比；a——線性方程的截距；b——線性方程的斜率。

4.3.2  計算定量結果相對偏差

平行操作的兩份案件樣品乙醇含量的相對相差按式（2）計算：

式中：

RD ——相對相差；

X1、X2——兩份案件樣品平行定量測定的乙醇含量數值；

X——兩份案件樣品平行測定乙醇含量的平均值。

4.4 空白樣品加標重復性考察

空白樣品加標量為80mg/100mL，考察其分析結果重復性，結果見下表：

表1. 80mg/100mL空白加標樣品重復性測試結果

兩個通道空白加標測試結果的相對標準偏差分別為：1.01%、0.96%。