生物體液差異蛋白質組學研究技術體系的建立

摘要:為探討以2D2DIGE 為核心的生物體液差異蛋白質組學技術體系,取2 組不同生物學狀態下的體液樣本進行研究。每組包含一例人類多發性硬化樣本和一例對照樣本,共設3 組平行實驗。經冷丙酮沉淀法除鹽提取蛋白并精確定量,分別用分CY5 和CY2 熒光染料按最小標記法對多發性硬化樣本和對照組進行標記。另再取混合蛋白內用CY3 標記。混合樣品后分別在3 塊2D2gel 上進行電泳,通過Typhoon 9400 多功能熒光掃描儀及DeCyder 22D 差異分析軟件進行DIGE 分析。差異蛋白用MALDI2TOF/ TOF 進行鑒定,將所得結果錄入Metarcore 計算平臺,進行蛋白質相關分析。結果表明,利用該方法研究不同生物學狀態下的體液標本,結合網絡圖譜分析,可得到較多有意義的候選蛋白信息。