蛋白質的室溫磷光法研究

摘　要　提出了牛血清蛋白(BSA ) 和人血清蛋白(HSA ) 的室溫磷光法, 蛋白質的磷光主要來自于包埋于其中的色氨酸殘基, 并對影響其室溫磷光強度的的各種因素: 如重原子濃度, 酸度, 除氧劑濃度等進行了詳細研究, 建立了測定痕量HSA 和BSA 的室溫磷光法。該法是以K I 為重原子微擾劑, 在水溶液中用N a2SO3 化學除氧后, 以287nm 為激發波長,BSA 和HSA 在443nm 左右的磷光具有較好的重復性和穩定性。在此條件下它們的線性范圍分別為: 1×10- 6—8. 6×10- 5mol?L 和3×10- 6—13×10- 5mol?L , 檢出限分別為: 2. 20×10- 7mol?L 和4. 10×10- 7mol?L 。同時, 還對它們的光譜性質如熒光、磷光壽命, 偏振等進行了測量。結果顯示BSA 中色氨酸殘基有兩種熒光衰減形式, HSA 則只有一種衰減形式, 它們的磷光屬于長壽命磷光, 都能引起光的偏振。