酶催化分光光度法測定蛋白質

摘　要　基于血清白蛋白對辣根過氧化物酶(HRP)催化H2O2 氧化鄰苯二酚紫的反應具有強烈的抑制作用,建立了一種測定血清白蛋白的新方法。在優化的實驗條件下: pH 4. 0 NaAc2HAc緩沖介質, (30 ±0. 2) ℃恒溫反應10 min,以430 nm為測定波長,本方法測定牛血清白蛋白(BSA)線性范圍為(0. 4～5. 0) ×10 - 7 mol/L;檢出限為8. 6 ×10 - 9 mol/L。以穩態速率法測定了米氏常數(Km )和米氏速率(Vm ) ,確定其抑制類型為競爭性抑制。方法用于人血清樣品中蛋白質的測定,操作簡便,靈敏度高,選擇性好,結果滿意。