Ssp dnaB蛋白質內含子介導的重組人腦鈉素的制備

摘　要　腦鈉素(BNP) 是臨床治療代償失調性心衰竭的有效藥物。將腦鈉素與組氨酸標簽(His-tag) 以及具有自我剪切功能的Ssp dnaB 微型蛋白質內含子進行融合表達。表達產物經Ni-Sepharose 親和層析及體外復性處理后, 用CM-纖維素對復性產物進行了濃縮, 并通過改變CM-纖維素柱內的pH及溫度, 誘導Ssp dnaB 微型蛋白質內含子的剪切作用, 使腦鈉素從融合蛋白中釋放并與載體蛋白(His-DnaB) 分離, 再經C4 反相高效液相色譜法進一步純化后, 從每升培養液中獲得了218mg 純度達97 %的重組人腦鈉素。體外活性測定結果表明, 重組人腦鈉素對兔胸主動脈條具有顯著的血管舒張效應, 其EC50 為
1194 ×10 - 6mgPmL。