利用蛋白質組學技術篩選輻射致癌相關蛋白質

【摘要】背景與目的: 輻射致癌的機制目前尚不明確。本研究通過建立輻射致癌的細胞模型, 應用蛋白質組學技術觀察輻射癌變細胞和正常細胞間的差異蛋白表達譜, 以期獲得輻射致癌相關蛋白。方法: 選取永生化的人支氣管上皮細胞株( BEAS-2B) , 利用γ射線照射誘導癌變, 建立輻射致癌的細胞模型。利用二維凝膠電泳技術, 篩選癌變細胞和正常細胞間的差異表達蛋白點并進行質譜鑒定分析。通過Western blot 技術對其中4 個蛋白: ENO1、Prx I、Dyrk2 和GPX1 在輻射致癌不同階段的表達情況進行分析。結果: 在輻射癌變細胞和正常細胞間共得到可信差異表達蛋白點59 個。其中14 個僅在癌變細胞中表達, 15 個僅在正常細胞中表達, 23 個在癌變細胞中表達降低, 7 個在癌變細胞中表達升高。通過質譜分析,共有26 個蛋白點得到鑒定, 主要包括一些參與細胞代謝、增殖、分化的酶類、信號調控蛋白、DNA 結合蛋白以及一些細胞結構蛋白和少數功能不明的蛋白及肽段。其中ENO1 和PrxⅠ隨輻射癌變的進展而升高, Dyrk2 和GPX1 隨輻射癌變的進展而降低。結論: 應用二維電泳技術可獲得輻射致癌差異表達蛋白譜, 篩選和鑒定出與輻射致癌相關的差異表達蛋白, 并可檢測部分差異蛋白在輻射致癌不同階段的表達情況。