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    • 組織因子膜外區融合蛋白基因的表達及產物的分離純化與活性分析

    上一篇 / 下一篇  2008-11-03 21:18:10/ 個人分類：分離純化

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    摘要　為構建表達組織因子(TF) 膜外區的融合載體, 制備組織因子膜外區, 抽提人胎盤組織的總RNA , 通過RT 2PCR 法擴增出TF 的cDNA 克隆至pU C18 并測定全序列L 然后以此為模板, 再次PCR 擴增出TF 膜外區(so lub le TF, sTF) cDNA , 并將其插入到谷胱甘肽巰基轉移酶融合表達載體pGEX 4T 21, 構建了tac 啟動子控制下的GST 2sTF 融合蛋白的表達載體L表達的融合蛋白經親和層析、凝血酶切得到純化的sTFL表達產物經EL ISA 驗證, 能特異性地與TF 抗體結合L重新脂化后, 該產物具有較大凝血活性L 以上說明采用融合蛋白表達系統可以大量制備組織因子膜外區,為研制國產重組凝血活酶試劑和研究sTF 的結構和功能創造條件L



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    TAG: 分離純化基因表達活性組織因子融合蛋白

     

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