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  • 縮醛磷脂的分離純化和鑒定

    上一篇 / 下一篇  2008-11-01 18:59:27/ 個人分類:分離純化

    • 文件版本: V1.0
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    摘要 目的 研究從心中提取和純化縮醛磷脂,并測定其純度,以利于進一步研究其生物學作用。方法 取新鮮豬心切塊,絞碎,制成勻漿后,再經一系列過程包括①總脂的提取; ②通過硅酸柱層析和硅膠薄板層析從總脂提取物中分離出磷脂酰乙醇胺(PE) 、磷脂酰膽堿(PC) 、磷脂酰肌醇( PI) 、磷脂酰絲氨酸( PS) 和鞘磷脂(SM) ,并從含PE 濃度最高的柱層析液中分離出PE; ③堿水解制備縮醛磷脂酰乙醇胺(plas2PE) ; ④通過硅酸柱層析和硅膠薄板層析從堿水解物中進一步純化和鑒定plas2PE; ⑤分別用Iodinedisappearance 法和Bartlett 法檢測plas2PE 制劑中plas2PE 的含量及無機磷的含量,并計算出其純度。結果 ①從總脂提取液中分離出下列幾種磷脂并經標準品鑒定出為PE、PI + PS、PC 和SM ,其Rf 值分別為0. 87 、0. 75 、0. 54 和0. 37 ; ②從含PE 濃度最高的柱層析液中分離出PE ,并經堿水解,制備出plas2 PE ,其在薄板層析板上的Rf 值為0. 81 ; ③plas2PE 制劑中無機磷含量為3. 161μmol/ml ,plas2PE 含量為3. 006μmol/ ml ,經計算plas2PE 的純度為95. 10 %。結論 豬心是縮醛磷脂含量豐富的器官,采用硅酸柱層析及堿水解分離是制備縮醛磷脂的有效流程。



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    TAG: 分離心臟提純縮醛磷脂類

     

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