淺析生物樣本分析的三大驗證方法

在進行生物醫藥研究時，生物樣本具有取樣少、藥物濃度低、內源性物質及個體差異等特點，這些因素可能會影響生物樣本的測定，因此需要建立合適的生物樣本分析方法。這些生物分析方法驗證和試驗樣品分析應該符合GLP原則，因此GLP生物分析至關重要。在分析方法建立之后，還要進行方法驗證，驗證的目的是為了保證分析方法適用于相關的樣品分析。

生物樣本分析的方法學驗證主要分為全面驗證、部分驗證和交叉驗證三種，今天我們來簡單了解一下這三種驗證方法。

1、全面驗證

大分子生物藥物由細胞培養而得，效價和免疫反應性批間差異很大，多數情況下沒有真正意義上的“純”大分子藥物對照品。這就要求制備標準樣品、質控樣品的對照品與臨床前和臨床給藥的對照品為同一批次。變換批次時，對照品使用前要進行分析鑒別以及生物分析評價來確證分析方法沒有改變。對于一個本質上為新藥的分析方法，以及對首次建立的分析方法需要進行全面的分析方法的驗證，對在分析方法中加入代謝物進行定量分析的時候也要考慮進行全面分析方法的驗證。

生物分析方法的建立和驗證對于獲得可信實驗結果至關重要。在進行GLP生物分析時，參加GLP條件下生物樣本分析的人員包括操作者和核對者，必須經過GLP法規及相關技能的培訓并考核通過。試驗前需要了解相關準則與法規，使用的諸如質譜、液相，電子天平、精密移液器等分析儀器還必須在驗證或強檢有效期內等等。美迪西生物分析服務部門擁有專業的科研團隊，分析實驗室配置先進的儀器設備，實行全面的信息化管理，實驗研究符合FDA/CFDA GLP標準要求，可以為客戶提供小分子藥物、生物制劑、疫苗和生物標記物的篩選與開發，以及臨床前和臨床研究。

2、部分驗證。

方法學驗證是整個試驗數據可靠的基本保證，因此其是各個實驗室標準操作規程(SOP)?的重點內容。已經過驗證的分析方法變更時可考慮做部分分析方法的驗證，如生物樣本分析方法在實驗室間的轉移、定量濃度范圍改變、生物介質改變、稀少生物介質、證實復方給藥后分析方法的特異性。這時候應報告所有的改變，并對重新驗證或部分驗證的范圍說明理由。

3、交叉驗證

比較兩個分析方法的驗證參數。常用于同一物質的不同分析方法的改變，如從液質聯用到ELISA的變化，或者兩個或兩個以上實驗室對同一物質按照同一方案進行分析時。同一實驗室采用不同分析方法或不同實驗室采用相同分析方法獲得的數據，需要比較數據且對分析方法要進行交叉驗證。盡可能在研究樣品分析前開展交叉驗證，需采用兩種分析方法分析相同的質控樣品或真正樣品。對質控樣品而言，兩種分析方法準確度應在15%以內；對研究樣品而言，至少67%樣品準確度應在20%以內。

建立可靠的和可重現的定量分析方法是進行生物醫藥研究的關鍵之一，為了保證分析方法可靠，必須進行方法驗證。生物樣品分析方法的建立、驗證和應用是臨床前藥動學和Ⅰ期臨床試驗研究中的重要組成部分，關系到后續研究的科學性和正確性，而且在分析方法建立階段就要開始考察，前期驗證階段的確證，和監測樣品分析階段。