人淋巴因子激活的殺傷細胞抗生素肽的分離純化

【內容摘要】　目的　分離純化人淋巴因子激活的殺傷細胞( lymphok ine act ivated k iller, LA K) 內源性抗生素肽。方法　采用密度梯度離心法分離人外周血單核細胞, 并用IL 22 和PHA 刺激培養。5% 乙酸勻漿細胞獲得其酸溶性提取物。應用制備性酸性尿素聚丙烯酰胺凝膠電泳技術和反相高效液相色譜技術分離純化多肽, T ricine2SDS2PA GE 鑒定其分子量, 并運用瓊脂糖彌散法鑒定其抗菌活性。結果　從人LA K 細胞酸溶性提取物中純化出多個多肽, 其中HL P22b、HL P23a 完全純化, 分子量分別為7. 9×103 u 和4×103 u。HL P22a、HL P22c、HL P23b 和HL P23c基本純化, 主帶分子量分別為7. 2×103 u、10. 4×103 u、6. 4×103 u、6. 4×103 u。HL P23a 具有抗金黃色葡萄球菌活性,HL P22a、HL P22b、HL P22c、HL P23b、HL P23c 具有抗金黃色葡萄球菌活性和抗白色念珠菌活性。結論　人LA K細胞含多種內源性抗生素肽分子。