雜色云芝漆酶的分離、純化和酶學特性研究

摘 要：雜色云芝發酵液，經超濾、DEAE-Sephadex A250 柱層析兩步分離、純化出兩型漆酶。以愈創木酚與酶帶在適當條件下反應呈棕紅色譜帶鑒定出漆酶譜帶。兩型漆酶分別命名為LacA 和LacB。經測定兩漆酶亞基的分子量分別為66.0kDa 和30.7kDa；等電點pI 分別為4.79 和5.18；LacA 的最適作用溫度是40℃，LacB 為50℃；保溫2h, LacA的半失活溫度為60℃，LacB 為90℃；LacA 和LacB 催化愈創木酚的酶活最適pH 值均為4.0； 二者的穩定pH 值也都在2.5~5.5 之間。LacA 催化氧化愈創木酚的Km 和Vmax 分別為286.5μmol×L-1 和292.4nmol× mL-1× min -1；LacB 催化氧化愈創木酚的Km 和Vmax 分別為813.0μmol × L-1 和127.4nmol × mL-1× min-1。