激光捕獲顯微切割技術純化的鼻咽癌和正常鼻咽上皮細胞的比較蛋白質組學研究

摘要為篩選鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma， NPC) 的分子標志物， 采用激光捕獲顯微切割技術(laser capturemicrodissection，LCM)分別從NPC 組織和正常鼻咽上皮組織(normal nasopharyngal epithelial tissue，NNET)中切割純化NPC
細胞和正常鼻咽上皮細胞(normal nasopharyngal epithelial cells，NNEC)，應用二維凝膠電泳(two-dimensional electrophoresis，2-DE)分離LCM 純化細胞的蛋白質， 圖像分析識別差異表達的蛋白質點， 基質輔助激光解吸電離飛行時間質譜
(MALDI-TOF-MS)和電噴霧電離串聯質譜(ESI-Q-TOF-MS)鑒定差異蛋白質點，Western blot 檢測差異蛋白cytokeratin 8 (CK8)在LCM 純化的NPC 細胞和NNEC 以及具有不同分化程度或轉移潛能的4 株NPC 細胞中的表達，免疫組織化學檢測CK8 在63 例NPC、28 例NNET 及20 例頸淋巴結轉移NPC 組織中的表達水平. 建立了LCM 純化的NPC 細胞和NNEC 的2-DE 圖譜，質譜鑒定了29 個差異蛋白質，其中15 個蛋白質只在NPC 表達或表達明顯增高，14 個蛋白質在NPC 中表達下調或缺失；Western blot 結果顯示，CK8 的表達水平在NPC 中較NNET 明顯下調，并與NPC 細胞株的分化程度和轉移潛能有關；免疫組織化學結果顯示，CK8 在NPC 組織中的表達較NNET 明顯下調，在頸淋巴結轉移NPC 中的表達較原發NPC 明顯上調. 研究結果提示，CK8 與NPC 分化及淋巴結轉移相關，有望成為預測NPC 轉移和區別NPC 分化程度的分子標志物.