基于IgG 檢測為模型的玻璃介質定量蛋白質芯片的研制及評價

摘要: 為研制高通量定量檢測的蛋白質芯片, 以人血清IgG 為研究模型, 選擇戊二醛基修飾的玻片為載體,蛋白質樣品溶解于20% 甘油的PBS, 由機械手將濃度為0.5 g/ L 人IgG 單克隆抗體點樣在玻片上, 人血清白蛋白為陰性對照, 以1%的BSA 為封閉液對蛋白質芯片進行封閉, 并經相應處理, 構建用于定量檢測人血清IgG 蛋白質芯片. 先以不同濃度IgG 標準品為待測樣品, 建立蛋白質芯片方法和ELISA 方法的標準曲線, 兩條標準曲線的R2 值分別為0.996 和0.994( P < 0.01) . 兩種方法的檢測人IgG 結果有很好的相關性(R2 = 0.993 7,P < 0.01) , 其敏感性均在15.625 μg / L. 用兩種方法分別檢測10 例人血清IgG, 結果顯示兩種方法的檢測的IgG 濃度有很好的一致性, 以玻片為載體的蛋白質芯片可用于微量生物樣品的定量檢測.