免疫放射分析技術原理

　　免疫放射分析技術原理

　　"將核素標記在抗體上，然后以過量的標記抗體與待測抗原結合，未結合的標記抗體通過和固相的抗原免疫吸附劑結合而去除，溶液中的放射性與待測抗原的含量呈正相關。根據檢測過程的操作步驟不同，有以下幾種類型

　　1、直接IRMA法

　　將待測抗原與過量的標記抗體進行溫育，使二者結合，然后加入固相抗原免疫吸附劑再次溫育，吸附游離的標記抗體。離心去除沉淀物，測定上清液中放射性強度，根據標準曲線即可得知待測樣品中抗原的含量。

　　2、雙抗體夾心IRMA法

　　在待測抗原內依次加入固相抗體和標記抗體，反應后形成固相抗體(Ab1)-抗原-標記抗體(Ab2)復合物，洗滌去除游離的標記抗體，測定固相抗體或載體上免疫復合物的放射性強度，根據標準曲線即可得知待測樣品中抗原的含量。此法僅用于檢測有多個決定簇的多肽和蛋白質抗原。

　　3、間接IRMA法

　　此法是在上述雙抗體夾心法的基礎上，進一步改良為用核素標記抗Ab2的抗體(羊抗兔或抗鼠的IgG)，反應后形成固相抗體(Ab1)-抗原 -Ab2-*Ab3(標記抗抗體)的四重免疫復合物。其中，Ab3可作為通用試劑，可省去標記針對不同抗原的特異性抗體。

　　4、BSA-IRMA

　　是將生物素-親合素系統(BSA)引入免疫放射分析，建立的新一代IRMA。此法最大的優點是使用生物素化抗體和以核素標記親合素為示蹤劑，可以通用于甾體類、前列腺素等小分子物質的檢測。由于1個抗體分子上可標記數十個生物素分子，而每個親合素又可與4個生物素分子結合，從而產生多級放大效應。同時生物素與親合素之間的親和力要比抗原抗體間的親和力大10萬-100萬倍，二者結合極為穩定，因此，使其靈敏度、特異性和精密度都大大提高。目前一些超靈敏度的 IRMA分析試劑盒就是應用上述原理制成的。