蛋白質樣本制備及IEF 時樣本上樣對乳腺癌蛋白質22DE 分離結果的影響

【摘要】　目的　通過對蛋白質樣本制備及IEF 蛋白質上樣時幾個重要環節進行探討,為乳腺癌組織蛋白質樣本22DE 分離結果優化提供重要的實驗與理論的依據。方法　通過Bio2Rad 公司提供的試劑盒對乳腺癌組織進行總蛋白提取、蛋白質純化、蛋白質定量,并分別對處理前后的乳腺癌蛋白質樣本進行SDS2PA GE 與22DE 分離。結果　乳腺癌組織蛋白質的等電點主要集中在p I5～8 范圍內,SDS2PA GE、蛋白質樣本純化與定量等措施及適當的IEF 上樣體積與上樣量可獲得良好的22DE 蛋白質分離結果。結論　樣本制備是22DE 蛋白質分離的關鍵,準確的取材、蛋白質樣本的SDS2PAGE 質量監測、適量的樣本上樣體積與上樣量、適當的p H 值范圍的IPG膠條的選擇以及采用蛋白質純化試劑盒對蛋白質樣本進行純化與濃縮是整個實驗成功的保證。