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淺析肺癌小鼠腫瘤的移植造模方法
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下一篇 2018-08-02 16:40:36
人肺癌裸鼠腫瘤模型是抗腫瘤藥研究常用的模型,利用裸鼠建立腫瘤模型,進行防治研究,是基礎醫學研究中的重要內容。保持腫瘤生物學特性的穩定,盡可能地模擬癌癥患者臨床生理特征是評價一個裸鼠異種移植瘤模型的成功的關鍵。肺癌小鼠腫瘤的移植造模方法有細胞培養、組織塊移植和勻漿液移植三種,腫瘤的來源是取病人新鮮瘤組織,培養傳代的細胞(細胞懸液)在實驗動物體內接種篩選出的高移植率的腫瘤細胞組織。
1、細胞培養移植造模
一般取對數生長期的腫瘤細胞,細胞酶消化后,多用無菌pbs或是無血清培養基稀釋成造模需要的細胞數目,按實驗目的進行不同部位的注射。細胞懸液造模一般需要大量的腫瘤細胞,一般會在1×10~7 上下的細胞數量。
2、組織塊移植造模
取培養細胞或是病人肺癌新鮮標本組織塊造模成功的動物移植瘤,當腫瘤直徑約1cm,脫頸處死實驗動物,無菌剝離瘤體,去除瘤體外包膜,用醫用生理鹽水沖洗2-3次,取魚肉樣新鮮組織剪成直徑約2mm均勻大小的瘤體組織塊,用25號接種針接種于實驗部位。人肺癌個體化傳代組織塊移植模型有望成為患者個體化治療提供藥物篩選,且研究發現多代接種有助于提高腫瘤移植的成功率。
基于組織塊法建立的移植瘤模型培養出的腫瘤組織不僅保留了親代腫瘤的生物學特征、染色體特征和腫瘤標志物等,還保留了親代腫瘤的組織結構特征,更大程度的模擬人體內環境。此模型可用于評價腫瘤藥物的療效、探索抗腫瘤藥物的耐藥機制、分析生物標志等。
3、勻漿液移植造模
取培養細胞造模成功的動物移植瘤,腫瘤體積約1立方厘米,脫頸處死實驗動物,無菌剝離瘤體,去除瘤體外包膜,剪碎,加入生理鹽水,用200
目銅網過濾,制備成單細胞懸液,臺盼藍染色計數活細胞調整實驗需要用細胞數目,注射于實驗部。
細胞培養和勻漿液移植,通過細胞計數,接種基數可控,單從皮下接種來看,造模的瘤體生長更為均勻,但是勻漿液相對來說制備復雜,且在處理過程中容易產生死細胞,引起實驗動物炎癥反應造成繼發感染等不良情況,而改良的組織塊接種適于中藥抗腫瘤篩選的實驗模型。
一般來說,裸鼠人類惡性腫瘤移植具有以下幾個典型特點:
(1)被移植腫瘤仍保持原有組織學構成或各種機能;
(2)人癌組織的組織培養物移植種于裸鼠時,能重現已在組織培養中消失的原有癌結構,同時幾乎很少能發現被移植腫瘤的轉移。這些特征有助于分析腫瘤的性質。
人體腫瘤移植于免疫缺陷動物,能保持其生物學特性,用于研究人體腫瘤對藥物的敏感性有很大的幫助,因此裸鼠腫瘤模型的建立有助于改進診斷模式及探索新的治療藥物。美迪西可以根據客戶的需求提供各種有效的原位移植模型,用來檢測藥物的有效性,常規的疾病模型有:乳腺癌、肺癌、結腸癌、膠質母細胞瘤、卵巢癌等,通過大小鼠、倉鼠等進行動物實驗。
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TAG: 小鼠腫瘤肺癌腫瘤模型移植造模