原代細胞傳代技術

　　一、貼壁細胞的消化法傳代

　　1、吸除或倒掉瓶內舊培養液。

　　2、加入1ml左右消化液(胰蛋白酶或與EDTA混合液)輕輕搖動培養瓶，使瓶底細胞都浸入溶液中。

　　3、消化2-5分鐘后把培養瓶放置在顯微鏡下進行觀察，發現原貼壁的細胞逐漸趨于圓形，在還未漂起時，棄去消化液，加入培養液終止消化。

　　4、用吸管將貼壁的細胞吹打成懸液，分別接種到另外兩到三個培養瓶中，置37℃培養箱中繼續培養。第二天觀察貼壁生長情況。

　　二、懸浮細胞的傳代

　　1、直接傳代

　　① 讓懸浮細胞慢慢沉淀在瓶底后，將上清吸掉1/2-2/3。

　　② 用吸管吹打形成細胞懸液后，分別接種到另外兩到三個培養瓶中，置37℃培養箱中培養。

　　2、離心法傳代

　　① 將細胞連同培養液一并轉移到離心管內，離心800-1000rpm，5分鐘。

　　② 去除上清，加新的培養液到離心管內，用吸管吹打使之形成細胞懸液。

　　③ 將細胞懸液分別接種到另外兩到三個培養瓶中，置37℃培養箱中培養。