體視熒光顯微鏡的使用方法

　　熒光體視顯微鏡是活體動物體內熒光成像技術的核心技術，它主要廣泛應用于生物、工業檢測、司法刑偵等領域，既是熒光防偽印刷檢測的必備工具，也是是礦物研究的理想儀器。

　　使用方法

　　(1)將材料片放在載物臺上。

　　(2)開啟熒光顯微鏡穩壓器，然后按下啟動組點燃紫外燈15min內不得關閉，關閉后3min內不得再啟動。

　　(3)將激發濾光片轉至v，分色片調到v，選用495或475nm阻擋濾光片。

　　(4)選用uvFL40、uvFL100熒光接物鏡鏡檢。

　　(5)在玻片上加無熒光油，先用40x，再用100x調焦鏡檢，呈現熒光。

　　(7)因熒光物質受紫外光照射時隨時間的增長熒光逐漸變弱，因此鏡檢時應經常變換視野。

　　(8)亦可用uvFL10或uvFL20低倍鏡鏡檢材料(用低倍鏡時不加無熒光油)。

　　熒光圖像的記錄

　　熒光顯微鏡所看到的熒光圖像，一是具有形態學特征，二是具有熒光的顏色和亮度，在判斷結果時，必須將二者結合起來綜合判斷。結果記錄根據主觀指標，即憑工作者目力觀察。作為一般定性觀察，基本上可靠的。隨著技術科學的發展，在不同程度上采用客觀指標記錄判斷結果，如用細胞分光光度計、圖像分析儀等儀器。但這些儀器記錄的結果，也必須結合主觀的判斷。

　　熒光顯微鏡攝影技術對于記錄熒光圖像十分必要，由于熒光很易褪色減弱，要即時攝影記錄結果。方法與普通顯微攝影技術基本相同。只是需要采用高速感光膠片如ASA200以上或24o以上。因紫外光對熒光猝滅作用大，如FITC的標記物，在紫外光下照射30s，熒光亮度降低50%。所以，曝光速度太慢，就不能將熒光圖像拍攝下來。一般研究型熒光顯微鏡都有半自動或全自動顯微攝影系統裝置。