大米中殺蟲環殘留量測定方法

　　1 主題內容與適用范圍

　　本標準規定了用氣相色譜法測定大米中殺蟲環的含量。

　　本標準適用于大米中殺蟲環的殘留量測定。

　　本方法最低檢出限為4.7×10-9g。

　　2 原理

　　大米樣品在酸性條件下，殺蟲環經甲醇提取后，通過液-液分配純化后再轉溶至甲醇中，用備有電子捕獲檢測器的氣相色譜儀測定，與標準比較定量。

　　3 試劑

　　所用試劑為分析純試劑。

　　3.1 鹽酸：5mol/L。

　　3.2 無水硫酸鈉：用前于105℃烘2h，備用。

　　3.3 助濾劑：celite 545。

　　3.4 甲醇：在本色譜條件下應無雜質峰，否則應重蒸餾至合格。

　　3.5 二氯甲烷：取一定量的二氯甲烷，用其體積一半的水振搖洗滌5或6次(最后一次必須待分層清楚后，放出二氯甲烷層，應避免將水帶入，以免加濃酸時爆沸產生危險!)，再用其5%體積的濃硫酸振搖洗滌，直至硫酸不變色。然后用5%氫氧化鈉溶液洗滌至中性，蒸餾水洗2或3次，再經無水硫酸鈉脫水干燥，通過全玻璃裝置重蒸餾，取其39～41℃餾分，經檢驗不含雜質峰。

　　3.6 1%草酸甲醇溶液。

　　3.7 固定相：5% OV-225 Chromosorb W(AW-DMCS)。

　　3.8 殺蟲環標準溶液：用甲醇將殺蟲環標準品配制成2.0?g/mL的工作液。

　　4 儀器

　　4.1 氣相色譜儀(具備63Ni放射源的電子捕獲檢測器)。

　　4.2 稻谷出糙機。

　　4.3 小型電動粉碎機。

　　4.4 旋轉式蒸發濃縮器。

　　4.5 往復式電動振蕩器。

　　4.6 60mL分液漏斗若干。

　　5 分析步驟

　　5.1 提取：將大米粉碎40目過篩，稱取40g，放入250mL具塞三角燒瓶中，加甲醇100mL和5mol/L鹽酸1.0mL，于振蕩器上激烈振蕩1h后，通過盛有少量celite545的濾紙過濾。收集50mL濾液轉入250mL圓底燒瓶中，用旋轉蒸發器于50℃水浴中濃縮至2～3mL左右。

　　5.2 純化：將殘留液轉至60mL分液漏斗中，分別用蒸餾水和二氯甲烷20mL分兩次洗滌燒瓶，每次洗液合并到分液漏斗中，然后用pH試紙檢查水層pH值應為1左右。

　　振搖分液漏斗30s靜置分層后，棄去下部二氯甲烷層，再用20mL二氯甲烷振搖洗滌3～4次，棄去二氯甲烷層。向分液漏斗中慢慢加入少量粉末碳酸氫鈉至 pH7～8。用30mL二氯甲烷輕輕振搖提取水層共3次，每次將二氯甲烷提取液通過盛有無水硫酸鈉的漏斗濾入250mL圓底燒瓶中，加0.2mL 1%草酸-甲醇溶液和5mL甲醇，用旋轉蒸發器于30℃水浴中濃縮至1.0mL左右，殘留液轉入具塞刻度試管中，視含量高低用甲醇定容至5～10mL。取 1.0?L進入色譜儀，外標法定量。

　　5.3 氣相色譜條件

　　5.3.1 色譜柱：?2mm×2m玻璃柱;

　　填裝涂有5% OV-225Chromosorb W(AW-DMCS)的固定相。

　　5.3.2 溫度

　　柱溫：180℃;

　　汽化室溫：200℃;

　　檢測室溫：240℃。

　　5.3.3 氣體速度：載氣(氮氣)流速30mL/min。

　　5.3.4 其他條件

　　儀器靈敏度：10;

　　衰減：16;

　　紙速：0.4cm/min;

　　氮氣：高純氮。

　　5.4 測定

　　按上述色譜條件調試儀器，待穩定后用微量注射器注入樣品或標準液，以保留時間為定性指標。

　　將殺蟲環的標準液用甲醇稀釋成0.4、0.8、1.2、1.6、2.0?g/mL的系列工作液，分別注入色譜儀1.0?L，測量峰高。以殺蟲環量為橫坐標，峰高為縱坐標繪制工作曲線，根據樣品的峰商定量。

　　6 計算

　　

　　式中：X——樣品中殺蟲環含量，mg/kg;

　　B——測得樣品的峰高值，查標準曲線后得到的殺蟲環量，ng;

　　V——定容體積，mL;

　　A——進樣量，?L;

　　m——樣品質量，g;

　　2——測定值相當于樣品量一半，計算全量應乘以2。

　　7 精密度和靈敏度

　　7.1 精密度

　　大米樣品添加回收實驗結果的變異系數小于10%。

　　7.2 靈敏度：0.001mg/kg。

　　8 其他

　　大米中殺蟲環及標準品殺蟲環色譜圖如下：