微量紫外分光光度計的操作 維護
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下一篇 2012-04-21 12:04:29
操作步驟:
1.準備好待測樣品,打開儀器;
2.選擇合適的檢測程序(以下以ssDNA為例);
3.在檢測孔加1.5ul待檢測物的溶解液(雙蒸水或buffer),單擊Blank按鈕;
4.用擦鏡紙擦去上下檢測孔;
5.滴加1.5ul待檢測樣品,單機Measure
6.輸出并保存檢測結果,
7.推出檢測程序。
如果儀器長期未使用,在使用儀器之前應進行循環Blank,檢查測量孔表面,以確保測量結果準確性。
步驟如下:
1.推開上臂,滴1.5ul雙蒸水于下表面,蓋上上臂單擊 “Blank”
2.推開上臂,用干凈的擦鏡紙擦去上下表面的液體
3.推開上臂,滴1.5ul去離子水于下表面,蓋上上臂單擊“Measure”
4.10mm路徑的吸光度值應小于0.04,如果不是重復步驟1-3
測量:
1.推開上臂,滴1.5ul空白液于下測試面
2.蓋上上臂,單擊“Blank”
3.推開上臂,用干凈的擦鏡紙擦去上下表面的液體
4.滴1.5ul樣品在下表面,蓋上上臂單擊“Measure”完成測量
5.推開上臂,用干凈的擦鏡紙擦去上下表面的液體
日常維護:
微量紫外分光光度計的主要維護要求,是保持測量表面的清潔。測量完成后,從上部和下部表面擦去樣品。用去離子水清潔表面和周邊地區,以防止樣品交叉污染和殘留物堆積。
定期維護:
儀器使用一段時間后,可能出現檢測孔污染,這時候儀器會自檢并提醒維護,可用0.5﹪的次氯酸鈉和無水乙醇進行清洗。
方法如下:
1.使用去離子水潤洗30秒,擦鏡紙擦干;
2.使用漂白劑氧化去污,通常0.5%次氯酸鈉即可,半分鐘后擦鏡紙擦干;
3.使用無水乙醇清洗30s左右,半分鐘后擦鏡紙擦干;
4.重復步驟1,擦干凈后將儀器放在無塵環境中.
注意事項:
1.對于一般的核酸、蛋白質樣品,檢測前徐使用漩渦振蕩器震蕩均勻為最佳,或至少以移液
器吸放數次混勻。若擔心DNA可能因前述動作而斷裂,可改以55℃加熱約一分鐘,使樣品在檢測前呈均勻狀態,以確保用于上樣檢測的2ul樣品具有代表性。
2.檢測后應當立即用拭鏡紙擦凈上下檢測孔。
3.同一滴液體只能做一次檢測,欲重復定量同一樣品,請擦掉前一滴,重新取出一滴進行 檢測。
4.核酸上樣為1ul-2ul,蛋白為2ul,上樣需一次完成。
5.大部分檢測錯誤源于未成形正確的液柱,正確液柱如下圖所示。如若未出現正確液柱,應當擦掉液滴,重新加樣。
6.不能使用含有腐蝕性的液體。
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