高效液相色譜儀常見故障的判斷與解決
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下一篇 2012-04-20 11:48:54
高效液相色譜儀一直以來就備受廣大實驗室愛好者的寵愛,操作簡單、高效、結果完美。但總會遇到儀器發生這樣那樣的問題,這里就為大家講解部分
高效液相色譜儀常發生的問題及相對應的解決方案。
(一)高效液相色譜儀保留時間變化
1、柱溫變化柱恒溫——必要時需配置恒溫箱
2、等度與梯度間未能充分平衡——至少用10倍柱體積的流動相平衡柱
3、緩沖液容量不夠用>25mmol/L的緩沖液
4、柱污染——每天沖洗柱
5、柱內條件變化——穩定進樣條件,調節流動相
6、柱快達到壽命——采用保護柱
(二)高效液相色譜儀保留時間縮短
1、流速增加檢查泵——重新設定流速
2、樣品超載——降低樣品量
3、鍵合相流失流動相PH值保持在3~7.5——檢查柱的方向
4、流動相組成變化——防止流動相蒸發或沉淀
5、溫度增加柱恒溫
(三)高效液相色譜儀出現肩峰或分叉
1、樣品體積過大——用流動相配樣,總的樣品體積小于第一峰的15%
2、樣品溶劑過強——采用較弱的樣品溶劑
3、柱塌陷或形成短路通道——更換色譜柱、采用較弱腐蝕性條件
4、柱內燒結不銹鋼失效——更換燒結不銹鋼,加在線過濾器,過濾樣品
5、進樣器損壞——更換進樣器轉子
(四)高效液相色譜儀鬼峰
1、進樣閥殘余峰每次用后用強溶劑清洗閥,改進閥和樣品的清洗
2、樣品中未知物——處理樣品
3、柱未平衡——重新平衡柱,用流動相作樣品溶劑(尤其是離子對色譜)
4、三氟乙酸(TFA)氧化(肽譜)每天新配——用抗氧化劑
5、水污染(反相)——通過變化平衡時間檢查水質量,
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