寵物食品中三聚腈胺和三聚腈酸的LC/MS/MS分析方法

背景

      最近爆出從中國進口的寵物食品中含有違法禁用的添加劑—三聚氰胺和三聚氰酸，并且造成寵物死亡。目前大量來自中國的此類寵物食品已要

求召回，現在產生此類寵物食品的企業和相關的檢測機構急需檢測此類食品的快速靈敏的檢測技術以確保此類寵物食品的安全可靠性。

     本報告建立了用LC/MS/MS快速高靈敏地檢測寵物食品中三聚氰胺和三聚氰酸的方法，樣品經過簡單的前處理后，就可進行分析，總分析時間為10分鐘，三聚氰胺和三聚氰酸的定量限均為1ug/kg。本方法采用多反應監察（MRM）的離子比率來進行定性確證。

前處理方法

樣品前處理方法采用液/液萃取（LLE）方法，步驟如下：

● 1 取5克樣品勻槳后再加入5ml乙腈

● 2 充分振蕩提取后，靜置15-30分鐘

● 3 再加入5mL 飽和氯化鈉溶液，充分振蕩混合，再靜置15 ～ 30分鐘

● 4 高速離心后，分離上清液

● 如果樣品中含目標物濃度很高，則需用水/乙腈（50/50）進一步稀釋

液相色譜條件

● 島津20AD組成的二元高壓液相色譜系統，CBM-20A控制器，半微量梯度混合器SUS-20A和SIL-20AC 自動進樣器。

● 色譜柱：GL Science Inertsil HILIC 5um  3*150mm,柱溫：40度

●  資生堂：CAPcell Pak         CR(1:4) 2.0*100mm 5um

● 流動相：A：含有10mM乙酸胺的乙腈，B：含有10mM乙酸胺的水

● 流速：5ml/min，進樣量：5ul，

● 流動相梯度表

 質譜條件

● 美國應用生物系統公司的API3200 串聯四極桿液質聯用儀，
電離方式：三聚氰胺ESI+，三聚氰酸辣ESI-，
檢測方式：MRM

MRM和離子源參數

兩種化合物的TIC和定量曲線(0.5ppb—500ppb)

濃度為1 ppb的兩種化合物的信噪比

結論

● 三聚氰胺和三聚氰酸用正相色譜進行分離，其色譜柱是親水鍵合的色譜柱。質譜檢測的電離模式是三聚氰胺用ESI+ ，三聚氰酸用ESI-，本方法重現性是在每個濃度點都重復五次進樣(RSD%<2)，線性范圍達到三個數量級（0.5ppb—500ppb），兩種化合物的檢測限（LOD）均為1ug/kg。

● 此方法已加入“可立快”技術平臺