《
色譜》2008年03期
活性藍F3GA固載的無孔單分散親水性交聯聚甲基丙烯酸環氧丙酯
親和色譜填料的制備與應用
卜春苗;王有賢;龔波林;閻超
以3.0μm無孔單分散親水性交聯聚甲基丙烯酸環氧丙酯樹脂為基質,與三嗪染料活性藍F3GA(Cibacron Blue F3GA)反應,制備出一種固定化染料聚合物高效親和色譜填料。考察了應用該填料時流動相中的鹽離子濃度、有機溶劑及流速等對牛血清白
蛋白(BSA)和溶菌酶(Lys)保留行為的影響。實驗結果表明,該染料親和填料具有良好的色譜性能。利用前沿色譜法
測定了染料與溶菌酶之間的表觀解離常數為5.26×10-5mol/L。使用該填料成功地從雞蛋清和小牛血清中分別分離純化了Lys和BSA,十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)
分析顯示Lys和BSA的純度分別為95%和92%。
【作者單位】:寧夏大學
能源化工
重點實驗室;寧夏大學能源化工重點實驗室;寧夏大學能源化工重點實驗室;上海通微分析技術有限公司 寧夏銀川750021;寧夏銀川750021;寧夏銀川750021;上海通微分析技術有限公司;上海201203;上海201203
【關鍵詞】:無孔單分散親水性樹脂;染料親和色譜;固定相;蛋白質;純度
【基金】:
科技部國際科技合作重點項目(2006DFA33690);教育部新世紀優秀人才支持計劃項目(NCET-04-0986);中國博士后科研基金資助項目(20060400976)
【分類號】:O657.7
【DOI】:CNKI:SUN:SPZZ.0.2008-03-029
【正文快照】:
親和色譜具有高選擇性,可從復雜
生物體系中高效、快速地分離出相應的目標產品,在
生命科學和生物工程產品分離純化及分析過程中有廣闊的應用前景[1]。目前親和色譜多以Sepharose和Dextran等軟膠作基質,但這些介質存在著受壓變形的缺陷,限制了其在實際應用中的快速純化和生產效[2