大豆根瘤菌固氮霉活性測定、乙炔還原法

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摘要：采用非接觸乙炔還原方法，檢測到固氮微生物可以非接觸地將乙炔還原成乙烯。據此推論固氮微生物能夠發射電磁波，也可以推論固氮酶能夠發射電磁波，此電磁波可以將乙炔還原成乙烯。因此進一步推論所有活性蛋白酶，其最基本的功能是發射不同波長的電磁波。

關鍵詞：非接觸；固氮微生物；氮同位素示蹤法；電磁波。

前言：生物固氮研究已有百年的歷史，人們已經投入了大量的力量，依然沒有徹底闡明固氮微生物的固氮機理，近年研究進展緩慢。此實驗對自然科學的眾多研究領域有重要的啟示作用。在作者能力范圍內檢索，固氮微生物能夠發射電磁波，此電磁波可以將乙炔還原成乙烯，此實驗結果是首次報道。

乙炔還原法是生物固氮研究的常用方法，用此方法檢測到固氮微生物具有將乙炔還原成乙烯的現象，在固氮研究領域等同于其具有將氮還原成氨的固氮能力。

乙炔還原法是在密封容器中把底物乙炔和固氮微生物一起培養，培養一定時間后，用氣相色譜儀測定生成的乙烯。本實驗特點為反應底物乙炔與微生物肥料中固氮微生物沒有直接接觸，其他部分是原有乙炔還原法，所以稱為非接觸乙炔還原法，此方法應該為原創。

在氮同位素示蹤法實驗中，也是非接觸的，因為氮是不容于水的，氮和固氮微生物也是非接觸的，非接觸乙炔還原法就是將非接觸進行到底，底物乙炔和固氮微生物分別裝在不同的瓶子中，進行固氮實驗。

固氮菌，土壤和根瘤組織中固氮酶活性測定-乙炔還原法

1.樣品的制備是稱取約1.0g的根瘤菌組織并放入20mL頂空瓶中，用儀器抽取2 ml 空氣后，再注入2 ml乙炔氣體；所述的樣品中乙炔的濃度為10%。

2.將瓶子置于30℃恒溫水浴鍋培養，30分鐘，避光；

3.計算公式：

固氮酶活性(C2H4 mL/(g╳h)=還原乙烯量（C2H4 mL）/根瘤鮮重（g）/ 反應時間（h）

4.樣品色譜圖

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圖1 標氣色譜圖（YX-乙烯，保留時間1.49min）

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