溶栓膠囊紅外光譜法的鑒別研究

摘要：本文采用紅外光譜法及二階導數譜對不同批次的溶栓膠囊(Plasmin capsules)進行無損快速鑒別研究。實驗研究表明，不同批次的溶栓膠囊其蛋白(酶)的成分都和原料有不同程度差別，并且加入的輔料的量也有較明顯的不同。輔料的添加量直接影響溶栓膠囊的生物活性。最后對各個批次的溶栓膠囊做重復性實驗，發現紅外譜圖有一定的波動，說明藥品的均勻性較差。

據《本草綱目》記載，經現代中醫理論證實，地龍(蚯蚓)性味咸寒，不但能通經絡，活血化瘀，又能平肝瀉火，故對瘀血阻于經絡者多奇效。該溶栓膠囊是從北京東郊蚯蚓養殖場培殖的正蚓科雙胸蚓屬(Lumbficidae Bimastos)赤子愛勝蚓(Eisenia foetida)中采用高科技提取出的蛋白水解酶，屬純中藥多分酶制劑。主要成分為3種溶解血栓的酶，即纖溶蛋白溶解酶、纖溶酶原激活物和膠原酶，具有抑制血小板粘附作用，既能溶解已形成的血栓，又能抑制血管內新血栓的形成，適用于中風、半身不遂、肢體麻木、高血壓癥等心血管疾病。據臨床發現，該藥物的藥效不是很穩定。因此，對該溶栓膠囊進行質控研究具有很大的現實意義。

傅立葉變換紅外光譜法(FTIR)是一種普遍且常用的分析方法，由于具有宏觀整體鑒定復雜體系的優點以及無損快速的特點，越來越廣泛的用于藥用動、植物的真偽優劣鑒別研究領域。孫素琴等人在該領域已進行系統化的質控研究。

二階導數譜能夠提高譜圖的表現分辨率，能把復雜體系中原來重疊的波峰區分開，增大紅外譜圖的分辨率 。本文采用紅外光譜與二階導數譜的結合對溶栓膠囊進行無損快速鑒別研究。

1 實驗

1.1 儀器條件

實驗儀器為Perkin Elmer公司Spectrum GX傅立葉變換紅外光譜儀，DTGS檢測器，分辨率為4/cm，掃描次數累加16次。

1.2 樣品來源

4個批次的中遠威藥業生產的溶栓膠囊與溶栓原料由首都醫科大學提供。批號為2OOO.1，2001.1，2002.1，2003.1。地龍是由北京東郊蚯蚓養殖場提供正蚓科雙胸蚓屬赤子愛勝蚓。

2 結果與討論

2.1 溶栓原料與地龍的紅外光譜比較

溶栓原料的165l/cm、1549/cm、1451/cm、1405/cm、1238/cm 吸收峰和地龍的1655/cm、1545/cm、1452/cm、1398/cm、1236/cm吸收峰分別相差4、4、1、7和2個波數。由于溶栓原料從地龍提取而來，可知溶栓原料的蛋白(酶)豐度增加，尤其是含有伯酰氨基團的蛋白(1405/cm對應伯酰氨的酰氨Ⅲ帶的吸收峰。)有很明顯的增加，并且添加了少量的Si02輔料(1079/cm這個寬而鈍的峰強有所增加)。

可以看出1727/cm、1551/cm、1468/cm、1412/cm附近的基團振動峰都有明顯的增強，1658/cm、1546/cm對應基團吸收強度的相對變化說明溶栓原料的蛋白含量有明顯的增加，所含成分也有所變化。出現該結果是因為前面提到的制備溶栓原料時對地龍的蛋白有選擇提取的緣故。

2.2 不同批次溶栓膠囊的紅外光譜比較

不同批次的溶栓膠囊主要的差別在于酰氨I帶、Ⅱ帶對應的1651～1641/cm、1549～1545/cm吸收峰與1155/cm、1084/cm、1055/cm附近淀粉等的特征吸收峰的相對強度不一樣。由于蛋白(酶)是溶栓膠囊的主要有效成分，酰氨I、Ⅱ帶的峰越強說明有效成分含量越多;反之，1155/cm、1084/cm、1055/cm附近淀粉等的特征吸收峰帶越強且酰氨I、Ⅱ帶的出峰位置越偏向低波數，有效成分含量則相對越低。各個批次加入的輔料量(包括：淀粉、SiO2等)大小次序為：2000.1>2001.1>2002.1>2003.1。并可進一步看出，2000.1與2003.1的SiO2輔料含量相對較多，2001.1與2OO2.1的淀粉含量相對較多。此外，2003.1的溶栓膠囊的蛋白峰特別是酰氨I、Ⅱ帶的峰和溶栓原料符合的非常好，雖然添加一定量的輔料但是可以斷定其療效應該和原藥療效最為接近。

2.3 重復性實驗

同時對各個批次的溶栓膠囊做重復性實驗，實驗發現各個批次的溶栓膠囊均有一定的不均勻性。2000.1批次的重復性實驗紅外譜圖，進行選點歸一化處理(選取1084cm 處對應的點)，可看出測的譜各吸收峰強度具有一定的波動性，說明目前利用SiO2崩解劑等溶栓膠囊制備技術依然無法完全解決溶栓膠囊成分混合均勻難的問題。

3 結論

綜上所述：不同批次溶栓膠囊質量的優劣可通過酰氨I、Ⅱ帶和l155/cm、1084/cm、1055/cm附近淀粉等特征吸收峰的相對強度判斷;四個批次的輔料含量順序為：2000.1>2001.1>2002.1>2003.1。首都醫科大學張祖詢等人的生物活性實驗也給出相同的順序，進一步說明輔料添加的多少直接影響藥物的療效。紅外光譜法及二階導數譜的結合分析方法無損快速準確，對不同批次的溶栓膠囊的區別鑒定獲得較為滿意的分析結果。

參考文獻

1 謝晶曦.常俊標.王緒明編著.紅外光譜在有機化學和藥物化學中的應用(修訂版)，北京：科學出版社，2001

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