高分辨率熔解應用
高分辨率熔解分析 (HRM) 可在 PCR 后快速監測并記錄樣品中擴增子的熔解曲線。HRM 的高靈敏度有利于檢測由 DNA 中單個堿基變化、核苷酸重復以及小片段缺失等因素引起的熔解溫度的微小變化。
HRM 越來越多地應用于:基因型確證、突變鑒定及篩查、克隆確認及甲基化分析。
HRM 常用于在高變基因中尋找難以檢測的堿基變化。HRM可檢測容易被 TaqMan 檢測法遺漏的新突變或未知突變。與TaqMan 檢測法相比,HRM 可檢測兩個引物間的任意突變。
雖然 HRM 可以更經濟有效地分辨細微變化,但需要嚴格進行熔解溫度控制。
Brilliant HRM Ultra-Fast Loci 反應預混液的優勢
? 混合后立即可用。其中含有 MgCl2 及 dNTP
? 穩定性更好。多次凍融后仍保持穩定,可減少浪費并提高批間可靠性
? 快速啟動 Taq。快速啟動的專利 Taq 聚合酶突變體只需三分鐘即可活化
? EvaGreen 按需釋放型染料。這種染料無毒,能夠以飽和濃度添加,可在保持高靈敏度的同時確保抑制性最小化
? 跨平臺使用。可用于任意具有 HRM 功能的熱循環儀Brilliant HRM Ultra-Fast Loci 反應預混液
現在,安捷倫可以為科學家提供 Brilliant HRM Ultra-Fast Loci反應預混液,以幫助他們實現更快捷、更可靠的“混合后立即
可用”功能。此反應預混液包含快速啟動 Taq 聚合酶突變體、經優化的 MgCl2、dNTP 以及一種按需釋放染料 EvaGreen,即
使是難以分析的基因型,也能實現信心十足的快速 HRM 分析。此預混液經驗證可用于 AriaMx 實時 PCR 儀器及具有 HRM 功能的第三方熱循環儀。