各款熒光定量PCR儀的性能比較

　　本人從事熒光定量PCR檢測試劑的開發工作，用過市場上主流的多款熒光定量PCR儀，如 ABI5700，ABI7700，ABI7000，ABI7300，ABI7500，MJ opticon，MJ opticon2，bio-rad ICycler，LightCycler1.5，roter-gene3000，line-gene等等。這種儀器各有各的特點，但都存在不足之處。

　　總的來說，ABI公司的熒光定量PCR儀產品比較多，成系列，但目前而言ABI5700和ABI7700不能實時在線地檢測熒光，因而已經退出歷史舞臺，尤其是ABI7700，不但很貴，而且采用蘋果機電腦，使用很不方便。ABI7000目前也已經淘汰，我用的這臺儀器老出問題，曲線極不光滑，但同樣的體系在國內機line-gene上曲線非常好，在ABI7500上曲線也很光滑，所以，本人估計是 ABI7000設計上有不足之處。現在市場上的ABI7300就是ABI7000的簡單升級版，硬件設計上幾乎沒有改變，只是換過幾個性能更好的配件，軟件有所升級。不過我個人認為ABI7300和7500的軟件有美化曲線之嫌，因為我有一次在ABI7000上做的很不好的文件，在ABI7500上打開時，曲線竟然變光滑了，而在者之前，在ABI7000上曲線很曲析不平的。另外我個人感覺ABI7900(ABI公司第二代產品)有些華而不實，價格應該是所有熒光定量PCR儀中最貴的，但性能指標還不如ABI7500(ABI公司第三代產品)，硬件設計上也不如ABI7500合理。

　　總的來說，ABI公司在熒光定量領域上還是做出很多貢獻的，其儀器在科研上還是可以用的，但由于硬件設計上的缺陷，需要額外的ROX染料進行校正，并且占用了一個檢測通道。國內的試劑廠商都不加ROX染料，科研用戶一般也不使用，所以其檢測的準確性和重復性還是很難保證的，尤其濃度較低的模板進行檢測時效果不佳，偏差會很大。

　　羅氏的LightCycler以運行速度快而著稱，在國內市場占有率最高，但本人最初使用時老出問題，有時候陽性曲線做不出來，后來發現這跟其獨特的毛細管設計有關系，因為毛細管很細，所以反應液在毛細管中的交換對流非常不暢，反應液在低溫是蛋白會以結晶狀態析出，沒有充分混勻時就加入毛細管會影響反應的進行，熱啟動酶不會受影響。所以本人在操作時都特意將反應液混合充分后再加入毛細管，這樣實驗就比較正常了。

　　本人開始使用羅氏的儀器時最怕毛細管斷裂，操作時特別擔心，熟悉以后，規范使用隨機贈送的操作配件，毛細管也就沒斷過。而且最重要的是，羅氏的儀器穩定性非常好，靈敏度明顯比其它儀器高，這也許跟毛細管和其檢測元件有關系，檢測重復性也非常好，所得定量結果可信度高。本人所使用的羅氏LightCycler1.5三四年了也沒出現硬件的故障。

　　羅氏公司推出的LightCycler2.0在原有基礎上檢測通道增加到六個，軟件功能也更加豐富。據說最新推出的LightCycler480是目前全球最先進的熒光定量PCR儀，突破了傳統技術的瓶頸，推出了不具邊緣效應的高通量熒光定量PCR儀。具體沒有用過，聽說使用非常靈活。

　　MJ的儀器總體上而言比較穩定，但檢測靈敏度不高，功能單一，檢測通道不多，運行時間太長。

　　伯樂的ICycler儀器也許是設計上的缺陷還是什么原因，同樣的反應體系，在該儀器上進行實驗時，陽性樣本的擴增曲線熒光增量比較低，檢測效果不好，所以在全國很少用戶使用該儀器。

　　Line-gene儀器的使用比較方便，但返修率較高，不過廠家就在國內，售后服務非常及時。

　　roter-gene3000跟羅氏公司的LightCycler有很多相似之處，只是roter- gene在操作時比較麻煩，而且采用普遍反應管，光透性不好，影響了檢測結果，這可以從其原始曲線上看出來，但該儀器的軟件所表現的是對數曲線，把其原始曲線上的曲析不平掩蓋了，其靈敏度不高。