色譜法及其分類

一. 色譜法

色譜法：根據各物質在兩相中的分配系數(表示溶解 或 吸附的能力)不同而進行分離、分析的方法。

各組分被分離后，可進一步進行定性和定量分析：

經典：分離過程和其含量測定過程是離線的，即不能連續進行

現代：分離過程和其含量測定過程是在線的，即 能連續進行

經典色譜法：將潮濕的碳酸鈣擠出玻璃管，用刀將各色帶切下，用適宜的方法進行分析;

現代色譜法：當一個兩組分(A和B)的混合物樣品在時間t1從柱頭加入，隨著流動相不斷加入，洗脫作用連續進行，直至A和B組分先后流出柱子而進入檢測

器，從而使各組分濃度轉變成電信號后在熒光屏上顯示出來。

根據峰的位置(出峰時間 t ) ——定性

根據峰的面積 A (或峰高h) ——定量

二. 色譜法分類

(一)按兩相物理狀態分

1. 氣相色譜法 (gas chromatography 簡稱 GC)用氣體作流動相的色譜法。

2. 液相色譜法 (liquid chromatography 簡稱 LC)用液體作流動相的色譜法。

3. 超臨界流體色譜法 (SFC)

用超臨界狀態的流體作流動相的色譜法。

超臨界狀態的流體不是一般的氣體或流體 , 而是臨界壓力和臨界溫度以上高度壓縮的氣體 , 其密度比一般氣體大得多而與液體相似 , 故又稱為 “ 高密度氣相色譜法 ”

(二)按分離原理分

1. 吸附色譜法( adsorption chromatography )：

根據吸附劑表面對不同組分物理吸附能力的強弱差異進行分離的方法。

如：氣一固色譜法、液-固色譜法——吸附色譜

2. 分配色譜法 (partition chromatography )：

根據不同組分在固定相中的溶解能力和在兩相間分配系數的差異進行分離的方法。

如：氣-液色譜法、液-液色譜法——分配色譜

3. 離子交換色譜法(ion exchange chromatography )

根據不同組分離子對固定相親和力的差異進行分離的方法。

4. 排阻色譜法( size exclusion chromatography)：

又稱凝膠色譜法 (gel chromatography ),

根據不同組分的分子體積大小的差異進行分離的方法。

其中：以水溶液作流動相的稱為凝膠過濾色譜法 ;以有機溶劑作流動相的稱為凝膠滲透色譜法。

5. 親合色譜法 (affinity chromatography)

利用不同組分與固定相共價鍵合的高專屬反應進行分離的方法。

(三)按固定相的形式

1. 柱色譜法(column chromatography )：

固定相裝在柱中 , 試樣沿著一個方向移動而進行分離。

包括 填充柱色譜法：固定相填充滿玻璃管和金屬管中

開管柱色譜法：固定相固定在細管內壁(毛細管柱色譜法)

2. 平板色譜法 (planer chromatography )：

固定相呈平面狀的色譜法。

包括 紙色譜法： 以吸附水分的濾紙作固定相;

薄層色譜法：以涂敷在玻璃板上的吸附劑作固定相。