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高效液相色譜儀壓力不穩怎么辦

上一篇 / 下一篇 2015-02-12 14:16:16/ 個人分類：色譜儀

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壓力不穩是高效液相色譜儀（HPLC）最為常見的故障，其表現：

①壓力在一段時間逐漸變化（升高或降低）；

②壓力瞬間變化（>3kg）。

總結原因不外乎以下四種情況：

⑴有氣泡；（2）漏液；（3）單向閥不良；（4）泵工作相位不正確。

對于①這種情況：一般是在開機的一段時間內出現，往往是流動相在色譜柱內還沒有平衡好、柱箱溫度還沒有恒定。這些都不屬于儀器問題，只要多平衡一會就會穩定。若使用的是梯度程序，由于流動相的比例正處在變化中，壓力也會跟隨變化。

對于第②種情況：通過下面幾步分析，很快就可以確定原因。

首先排除氣泡因素：氣泡的產生是由于流動相中溶解了空氣，在泵壓的作用下空氣會分離出來，氣泡留在泵體內排不出去，它不僅影響到流量的準確，泵壓也會不穩，這時我們只要打開排廢閥，利用快速沖洗功能很快就能將氣泡趕出。

為防止氣泡產生，最好的辦法就是使用在線脫氣裝置。沒有脫氣機時，流動相要經過脫氣處理。超聲波震蕩是常用的除氣泡方法，雖然簡單但效果不佳，不妨將流動相用微孔濾膜多過濾兩遍，利用真空泵的負壓，將溶解在流動相中的空氣釋放出來，其效果要好些。

如果使用中我們發現，連接過濾頭的輸液管中有微小的氣泡流動時，這說明過濾頭有堵塞現象必須清洗，你可用10％的硝酸進行超聲15分鐘，如果還有氣泡產生那就該換新濾頭了。

其次，要檢查的是輸液泵有沒有漏液現象，一般接在泵后的管道漏液會使壓力降低，對壓力穩定性影響不大。如果泵內柱塞墊或柱塞桿磨損了那就不一樣了，它不僅壓力上不去、變化大、流量也不足。只要觀察到泵頭或沖洗管漏液（有沖洗瓶時液位會升高），柱塞墊或柱塞桿肯定有問題。

第三是單向閥不良，當有鹽份或者雜質等污染物附著在單向閥內球體和閥體表面時，就會破壞密封性，造成輸液的單向性能降低，泵雖然在工作，但就是輸送不好液體，嚴重時不能輸液。反映到壓力上，表現為嚴重不穩或沒有壓力。這時你可以卸下單向閥，用異丙醇超聲清洗20分鐘。如果有鹽份，再用熱水超聲清洗一遍效果會更好。若清洗后還達不到要求，可將單向閥再接到流路上用大流量異丙醇沖洗。單向閥的結構比較精細，如果沒有把握最好先不要分解清洗，用超聲波清洗時要注意擺放的位置防止部件震散，否則裝配后效果會不理想。當單向閥內的球體損傷時就只有更換了。

最后，引起壓力不穩還有一種情況，就是泵工作的相位存在問題，這種情況發生的比較少，可以通過調節泵的初始位置解決。以上四個方面基本包含了泵壓不穩的所有原因，對于大多數用戶只要順著這個思路檢查，一般的故障都能得到解決。

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