蛋白質分子量測定
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下一篇 2008-08-01 15:11:55/ 個人分類:蛋白質(多肽)藥物理化分析
方法:質譜法
原理:蛋白質分子離子化后通過質量分析器對其質荷比進行分析,或進一步通過算法(如高斯算法)得到樣品的精確分子量。
儀器:BrukerAutoflex Ⅱ(MALDI-TOF-TOF-MS)
樣品要求:
含鹽量:揮發性無機鹽<20mM;不揮發性無機鹽<5mM
樣品蛋白質總含量>50pmol;純度>90%
樣品應盡量保持其純度,不要添加任何保護劑或其他物質
實例分析:
大分子量樣品的分子量測試分析:
樣品理論分子量:67680Da

圖譜解析:根據圖譜得到的分子量為67695.3893Da
常見影響測試的情況:
1. 含鹽或其他雜質的量過高。
2. 蛋白質純度不足。
3. 蛋白質本身特性(如糖基化)造成難以離子化,測試無結果。
4. 分子量超出測量范圍(太大或太小)。
5. 有雜蛋白污染。
6. 原蛋白質發生了降解。
7. 樣品量太少
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TAG: 蛋白分子量