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  • HPLC肽譜圖

    上一篇 / 下一篇  2008-08-01 15:10:03/ 個人分類:蛋白質(多肽)藥物理化分析

    原理:樣品蛋白先經過酶解后進入HPLC,通過反相色譜柱根據肽段的不同保留時間進行分離,得到HPLC肽譜圖。
     
    Agilent HPLC 1090 /Agilent HPLC 1100
     
    樣品要求:
    樣品純度>90%; 濃度>1mg/ml(或者每批濃度一致);總體積>1ml
    緩沖液最好為50-100mmol NH4HCO3(pH 7.8-8.0)或其他易揮發性緩沖液
     
    實例分析:
    儀器名稱:高效液相色譜HP1090
    試驗條件:
    酶種類:dequencing-trypsin(promega)
    色譜柱類型:CTI (USA) C18, 2.1mm×50mm (214nm)
    洗脫條件:流動相 A 液:0.1%TFA  99%H2O;B液:0.1%TFA  80%ACN
                   洗脫方式:0-5min 10%B液,5-65min 10-100%B液
     
    某樣品HPLC的肽譜圖

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    TAG: pmf肽指紋圖譜

     

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