涂片找抗酸桿菌操作規程(改良堿性復紅法)
1 檢驗目的
檢驗樣本中是否含有抗酸桿菌,為臨床提供診斷依據。
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2 原理
結核菌、麻瘋桿菌、恥垢菌等抗酸性菌,因其菌體表面有一層脂或脂質之皮膜不易著色,但一經著色后酸或乙醇的作用亦是不容易把它脫色。利用這特性并以增強的染色液予染色,然后再以酸及乙醇加以處理,使其脫色后再對比染色,此時抗酸性菌仍是固定著最初色素的顏色(紅色)。
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3標本要求
(1)標本類型:病人的痰、穿刺關節液、腹水、胸積液、組織、腦脊液、分泌物、尿液等
(2)標本采集:見標本采集手冊(一般須得深咳痰,其它無特殊要求。)
(3)標本儲存和運輸:可室溫保存、室溫運送。病人標本須密封運送以避免污染環境。
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4 容器和添加劑類型
痰盒、尿杯、試管等
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6 試劑
(1)???????試劑名稱:結核菌染色液
(2)試劑生產廠家:廣東省結核病研究所統一配制
(3)包裝規格:3X500ML
(4)試劑盒組成:
試劑1:石碳酸復紅液
試劑2:酸性酒精溶液
試劑3:亞甲基藍溶液
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7設備:
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8操作步驟
⑴涂片經火焰固定,加石碳酸復紅液染色5分鐘或更久(需加溫)。
⑵水洗(之后盡可能將水瀝干)。
⑶加酸性酒精溶液,脫色1-2分鐘。
⑷水洗(假如標本面還可以看到殘存紅色時,再加酸性酒精溶液脫掉紅色為止)。
⑸加亞甲基藍溶液染色30秒,水洗,干燥。
(6)鏡檢。
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9?干擾和交叉反應
麻風菌可能對檢驗結果產生影響。
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10?? 生物參考區間
涂片未見抗酸桿菌
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11?患者檢驗結果的可報告區間
涂片未見抗酸桿菌/涂片見細長、紅色抗酸桿菌
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12?臨床意義:
結核分枝桿菌不產生內毒素和外毒素,其毒力主要是在機體中細胞內、外生長與大量繁殖的能力,成分與其代謝產物引起反應(Ⅳ型)導致一系列組織學上的意義。