PEG介導的動物細胞融合技術 實 驗 原 理 豬elisa試劑盒
PEG介導的動物細胞融合技術 實 驗 原 理 豬elisa試劑盒
利用PEG介導的動物細胞融合，其實驗原理到目前為止還沒有完全定論。學者們一般認為，PEG改變各類細胞的膜結構，使兩細胞相互接觸部位的膜脂雙層中磷脂分子發生疏散、進而使其結構發生重排，再加上膜脂雙層的相互親合以及彼此間表面張力的作用，引起相臨的重排質膜在修復時相互合并在一起, 使兩細胞的胞質溝通, 從而造成相互接觸的細胞之間發生融合。
豬elisa試劑盒利用PEG介導細胞融合, 其融合效果受以下幾種因素的影響。1. PEG的分子量與濃度: 細胞融合效果與PEG的分子量及其濃度成正比；但PEG的分子量越大、濃度越高, 對細胞的毒性也就越大。為了兼顧二者，在實驗時常常采用的PEG分子量一般為1000~4000，濃度一般為40~60%。2. PEG的pH值: 經驗證，PEG的pH值在8.0~8.2之間融合效果zui好。3. PEG的處理時間: 處理時間越長，融合效果越好, 但對細胞的毒害也就越大。故一般將處理時間限制在1分鐘之內。本實驗中細胞融合后無需繼續培養, 故處理時間可適當放寬至數分鐘。4. 融合時的溫度: 由于生物膜膜的流動性與溫度成正比，故細胞的融合效果也與溫度成正比。因此，為了獲得更好的融合效果, 在細胞可能承受的溫度范圍內可適當提高處理的溫度。對于哺乳動物的細, 一般采用的溫度為38~40℃。
本實驗所用材料為雞的血細胞，這是因為: 1. 雞血細胞具有細胞核，便于對融合細胞進行鑒別；2. 實驗材料便宜、易得。細胞融合與否，可通過觀察細胞內核的數目來進行鑒別。細胞內只有一個核，定為未融合細胞；有二至多個核，定為融合細胞。
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