一、實驗試劑;
1、1.75mmol/L 硫酸溶液
2、15g/L?? 鎢酸鈉溶液
3、雙縮脲試劑;取硫酸銅(CuSO4*5H20)3.0g溶于500ml蒸餾水中加酒石酸鉀鈉 9.0 gKI 50g使溶,加 6 moL/LNaOH液 100 ml加水到1000 ml混勻.密閉貯存于聚乙烯瓶內。
4、蛋白質標準液(2.0 g/L)用準確定值的混合入血清,以 3 g/L的苯甲酸液作稀釋,釋成 2.0 g/L的濃度,貯存待用.
二、實驗方法:
1、留取 24 h尿液標本,(加甲苯防腐),混合后,記總量,取小量尿液離心用濾紙過濾.
2、先作蛋白質定性+-++在10ml刻度離心管加尿液5ml如(+++-++++)則在管中加尿液lml蒸餾水4ml.
3、加75mmol/L硫酸2.5ml混合.
4、加鎢酸鈉2.5ml,充分混合靜止10分鐘
5、離心沉淀5分鐘傾去上清,保留沉淀加生理鹽水1.0ml混合,為測定管.
6、按下表操作
?????????????????????????????????? 測定管??? 標準管
Pr標液????????????????????????????? ? ? ? ? ? ? ?? ? 1.0
雙縮同試劑(ml)????????? 4.0?????????? 4.0
充分混和,37℃水浴30分鐘,用540nm處比色,讀取SU
三、計算:
24小時尿蛋白總量(g)=(V/S)×50×(0.05/固定管尿量(ml))×(24總尿量/1000) 展開? |