血球計數板的誤差來源及避免方法
誤差來源
1、鏡檢計數室。
因前一次清洗不到位,或者保存過程中存在污染,更或者因操作不當導致的計數室存在劃痕,若不及時清洗或更換,則會對后期實驗計數產生極大影響。
所以,在每次使用血球計數板之前都需要加一步鏡檢計數室,如若在鏡檢時發現計數室有污物,則需按要求清洗并吹干后再進行實驗
2、搖勻后取液。
在吸出培養液進行計數之前,需輕輕震蕩試管,使菌體分布均勻,防止聚沉淀,從而提高計數的代表性和準確性。
3、先蓋血蓋片后加菌液。
在菌懸液搖勻后,應先在血球計數板上蓋上血蓋片,再用滴管吸取少許菌懸液,從計數區中間平臺沿血蓋片的上邊緣滴入一小滴菌懸液,利用液體的表面張力一次性充滿計數區。
若先加菌液再覆蓋血蓋片,則容易因為菌液加入過多,而導致血蓋片未與血球計數板支持柱接觸,血蓋片浮于菌液上方而導致最后計數偏大,同時會因為有氣泡產生而導致計數偏小。
避免方法:
1、避免技術誤差,糾正儀器誤差。
所用器材均應清潔干燥,計數板、血蓋片、微量吸管及刻度吸管的規格應符合要求或經過校正。
2、縮小計數域誤差及分布誤差。
3、降低異常標本的干擾誤差。
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