AB SCIEX成功參加首屆亞太國際生物分析最新進展研討會
2011年1月11日晚,首屆亞太國際生物分析最新進展研討會舉辦前夕,ABSCIEX公司在上海浦東淳大萬麗酒店,舉辦了別開生面的會前酒會及報告演講。來自亞太地區生物分析領域的100余位專家們出席了酒會。這些專家大部分來自跨國藥企、CRO公司、和國內知名的研究機構,以及日本、韓國、印度、馬拉西亞等國家的研究者。
與國外生物分析相關的酒會形式非常接近, AB SCIEX公司為大家準備了各式茶點、美酒。大家三五成群地聊天,很快便相互熟識,熱情交談起來。到場嘉賓們在這種歡快的氛圍中輕松地度過了一個半小時的時間。
酒會現場
酒會現場
AB SCIEX公司亞太地區市場經理Matthew Grigg博士作為此次酒會的主持人,對大家的到來表示熱烈歡迎并祝愿首屆亞太國際生物分析最新進展研討會勝利召開。
AB SCIEX公司亞太地區市場經理Matthew Grigg博士
接下來,到場嘉賓仔細聆聽了AB SCIEX公司為大家安排的兩個演講報告。
?
用于生物醫藥的LC-MS定量分析方法
葛蘭素史克公司(GSK)副總裁Eric Yang博士,題目:LC-MS for the Quantitative Bioanalysis of Biopharmaceuticals
首先來自葛蘭素史克公司(GSK)副總裁Eric Yang博士作為特約演講嘉賓,為大家帶來《用于生物醫藥的LC-MS定量分析方法》的報告。
為什么要將LC-MS/MS用于蛋白質定量呢?Eric Yang博士給出了以下回答:LC-MS/MS可以縮短先導藥物開發的時間,提高實驗效率;LC-MS/MS開發配體結合測定新方法,無需使用特定的配體結合試劑;可用于代謝產物的定量分析。
Eric Yang博士接下來列舉了運用LC-MS/MS對GSK1995057、GSK716155、GSK933776三種藥物進行定量分析的研究實例。GSK1995057是一種抗體治療藥物(分子量13 kDa),GSK716155(Syncria)是一種融合蛋白藥物,GSK933776(ant-beta amyloid)是單抗體藥物。
GSK1995057定量分析研究中,由于在沒有特殊抗體結合情況下,傳統的ELISA方法很難在血漿中檢測到低含量的GSK1995057,并且抗體內源性物質將帶來高背景干擾。將高靈敏度、高選擇性的LC/MS/MS方法用于檢測猴子血漿中GSK1995057,當吸入輕微劑量,質量下限≤1ng/ml(76 pM);而用ELISA方法質量下限為0.35ng/ml;加上利用96孔板,整個LC/MS/MS方法便可以實現自動化,通量高(每3分鐘分析一個樣品)。試驗針對分子量13050的治療用dAb,選擇了分子量13076的內標蛋白,監測[M+2H]2+ - y2離子的通道。樣品采自大猴血漿(0.3 mL),用固相萃取后干燥和重組,然后進行還原/烷基化/酶解,最后用LC-MS/MS分析,最后獲得線性范圍為1 ~ 500 ng/mL,精密度達到要求。同時LC-MS/MS實驗還和ELISA做了對比實驗。
Syncria(GSK開發的2型糖尿病治療新藥)在人類血清白蛋白(HSA)中含量可達到90%以上,人類血清蛋白內源性物質同樣為檢測帶來高背景干擾。Eric Yang博士在實驗中不僅用到ELISA方法還用到LC/MS/MS方法,藥代動力學研究數據顯示,LC/MS/MS方法測得的Syncria最大濃度值與ELISA方法結果相同,但是在消除相中濃度卻高出了ELISA方法測定值。Eric Yang博士懷疑是有代謝產物產生了。
GSK933776實驗中,從CDR肽結合區(Fc區)尋找到一種獨特的肽作為替代肽段進行LC/MS/MS定量分析,得到了滿意的結果。
報告最后,Eric Yang博士總結說,LC/MS/MS是對蛋白質治療分子定量分析的有效手段,是分析生物制藥化合物的有力工具;LC/MS/MS用于比較免疫在藥代動力學研究中可提供更多的信息。隨著LC/MS/MS定量生物分析方法開發,也應該對其加以規范,期望將來LC/MS/MS能同時完成藥代動力學和藥效學的測量。