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    操做液相色譜時影響保留時間的變化的因素

    2022.4.21

    影響液相色譜保留時間的因素:
    1、流動相的比例與極性。對于不同的柱子,分離度和保留時間往往都會有點差別,所以在操作的時候:a、可以適當調整流動相的比列,如甲醇—水(90:10),如分離效果與保留時間延長,可以調整88:12或者92:8或者95:5等。b、有時候還需要更換流動相的組成,甲醇就可以換成乙腈,看具體的實際操作而定。
    2、柱子與柱溫。不同的柱子保留時間會有所差別,主要是載體的吸附性和固定液的純度不同,但保留時間一般不會相差太大,可以根據對照品或者標準品的保留時間指定。柱溫在HPLC操作時,一般就調整到室溫或者30度。
    3、流速。流速的大小,液相色譜一般調整在0.8mL/min或者1.0mL/min。
    4、進樣量。進樣量大,保留時間往往會延長。
    5、輸液系統的壓力,當高壓流動相通過層析柱時,可降低樣品在柱中的擴散效應,可加快其在柱中的移動速度,保留時間將會縮短。
    具體的影響因素還要在實際操作中慢慢考察,經過調整后才可以的到較好的色譜條件。

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