PCR非特異性擴增的原因及處理辦法
原因:
? ? 1、引物特異性差
? ? 2、模板或引物濃度過高
? ? 3、酶量過多
? ? 4、Mg2+濃度偏高
? ? 5、退火溫度偏低
? ? 6、循環次數過多
對策:
? ? 1、重新設計引物或者使用巢式PCR
? ? 2、適當降低模板或引物濃度
? ? 3、適當減少酶量
? ? 4、降低鎂離子濃度
? ? 5、適當提高退火溫度或使用二階段溫度法
? ? 6、減少循環次數
推薦
原因:
? ? 1、引物特異性差
? ? 2、模板或引物濃度過高
? ? 3、酶量過多
? ? 4、Mg2+濃度偏高
? ? 5、退火溫度偏低
? ? 6、循環次數過多
對策:
? ? 1、重新設計引物或者使用巢式PCR
? ? 2、適當降低模板或引物濃度
? ? 3、適當減少酶量
? ? 4、降低鎂離子濃度
? ? 5、適當提高退火溫度或使用二階段溫度法
? ? 6、減少循環次數