氨基酸紙層析為什么會出現拖尾現象
究其原因，經自己多次親手操作，多次反復對比，始悟出一些道理，敘述如下：拖尾現象是指展層，顯色后在層析分配圖上，所看到的某一種氨基酸的分子位移，不是如標準圖譜所示的那樣，完整地顯示在某一位置上，而是形成象笤帚似的那樣，前端粗圓而逐漸細小下來，宛如拖著一個尾巴。其圖所呈顏色也是由濃漸淡。其圖象的出現，原認為是在實驗中，對影響Rf值的主要因素要求，掌握不夠所致。諸如，物質結構與極性對Rf值的影響，層析溶劑對Rf值的影響，PH對Rf值的影響(溶劑、濾紙和樣品的PH值)，溫度對Rf值的影響，濾紙的質地是否均勻，薄厚是否適當，纖維的松緊度是否適中等對Rf值的影響，展層的方式(上行、下行)對Rf值的影響。然而在多次實驗過程中無論怎佯嚴格遵循其影響Rf值的主要因素的要求，都仍不可避免地要出現拖尾現象。此時，這就需要從具體操作規范方面，諸如樣品的處理，點樣、展層、顯色等幾個操作程序去考慮思索，經仔細分析，樣品的處理是為除去雜質純化樣品，達到層析分配某氨基酸的情晰顯色圖像；展層過程是在上述影響Rf值的主要因素要求下
進行，使樣品達到一個適當的位移，便于在顯色后從圖象上，區分不同樣品的氨基酸；顯色是在用配制好的，與水不相混合，并揮發性較快的 邑劑噴霧后迅速吹干的。更何況顯色劑又是含水量極低，不會影響洋品的斑點擴散，那么問題就集中在點樣這個操作程序上了。點樣是將被層析分配的幾種氨基酸混合液，和為了對照實驗結果，而分別配制的幾種氨基酸的溶液，用微量點樣管或毛細管，或血球計數器將5一j5微升的樣品，點在以濾紙為惰性支持物的層析紙上設計好的多點位置中去。點樣后要自然風干，或冷風吹干。最好不要用加熱裝置，如吹風機，燈泡之類的熱源將其樣品點加速干燥。因為加熱裝置在學生操作時，一但注意不夠，掌握不好，則溫度升高勢必要使樣品破壞，更會使佯品點干的太燥。正是由于這樣，樣品點太干燥，使其樣品物的分子，牢固地吸牢在層析紙的纖維上。所以在展層過程中，樣品點的每個物質分子，不能在層析紙上同時起步，而是形成了有先有后，魚貫而上行或下行的狀況，最終使洋品物質的分子，不能同時都集中到達一個位置。致使在顯色后，實驗結果的圖象上，觀察到的不是一個完整的斑點，而是一個拖著尾巴的斑點。這就是上述所說的拖尾現象。
鹵、結束語 ’
紙上分配層析所出現的拖尾現象，究其原因很簡單，就是在點樣品后，樣品點吹的太干燥所致。原因太簡單了，往往被人們容易忽略，更引不起人們的重視。但它確實在困擾著人們的實驗效果。為此，建議應在該實驗的點樣操作中，加上一句，“樣品點不要砍的太干燥，否則，樣品物質的分子，會牢吸在層析紙的纖維上，出現拖尾現象”。
摘自：
1994年 3期《晉東南師專學報》：-67-67,95
關于對用“紙層析法分離鑒定氨基酸”實驗中出現拖尾現象的分析
趙晉德
