水質糞大腸菌群的測定濾膜法（一）
水質糞大腸菌群的測定濾膜法
1適用范圍
本標準規定了測定水中糞大腸菌群的濾膜法。
本標準適用于地表水、地下水、生活污水和工業廢水中糞大腸菌群的測定。
本方法的檢出限：當接種量為100ml時，檢出限為10CFU/L；當接種量為500ml時， 檢出限為2 CFU/L。
2規范性引用文件
本標準引用了下列文件或其中的條款。凡是不注日期的引用文件，其有效版本適用于本 標準。
GB/T 14581水質湖泊和水庫采樣技術指導
HJ494水質采樣技術指導
HJ/T91地表水和污水監測技術規范
3術語和定義
下列術語和定義適用于本標準。
3. 1糞大腸菌群 fecaI col iforms
又稱耐熱大腸菌群(thermotolerant coliforms)。44.5°C培養24h,能在MFC選擇性培養 基上生長，發酵乳糖產酸，并形成藍色或藍綠色菌落的腸桿菌科細菌。
3. 2菌落形成單位 colony-forming un i ts (CFU)
單位體積樣品中的細菌群落總數。
4方法原理
樣品通過孔徑為0.45um的濾膜過濾，細菌被截留在濾膜上，然后將濾膜置于MFC選 擇性培養基上，在特定的溫度(44.5°C)下培養24
h,膽鹽三號可抑制革蘭氏陽性菌的生長， 糞大腸菌群能生長并發酵乳糖產酸使指示劑變色，通過顏色判斷是否產酸，并通過呈藍色或
藍綠色菌落計數，測定樣品中糞大腸菌群濃度。
5干擾和消除
5.1活性氯具有氧化性，能破壞微生物細胞內的酶活性，導致細胞死亡，可在樣品采集(8.1) 時加入硫代硫酸鈉溶液（6.6）消除干擾。
5.2重金屬離子具有細胞毒性，能破壞微生物細胞內的酶活性，導致細胞死亡，可在樣品 采集（8.1）時加入乙二胺四乙酸二鈉溶液（6.7）消除干擾。
6試劑和材料
除非另有說明，分析時均使用符合國家標準的分析純試劑或生物試劑，實驗用水為蒸餡 水或去離子水。
?
1 MFC培養基：
?
胰腺 10 g
蛋白腺 5g
酵母浸膏 3g
氯化鈉 5 g
乳糖 12.5 g
膽鹽三號 1.5 g
1%苯胺藍水溶液 10 ml
1%玫瑰紅酸溶液（溶于8.0 g/L氫氧化鈉液中） 10 ml
將上述培養基中的成分（除苯胺藍和玫瑰紅酸外），溶解于1000 ml水中，調節pH至 7.4,分裝于三角燒瓶內，于115°C高壓蒸汽滅菌20
min，儲存于冷暗處備用。臨用前，按上 述配方比例，用滅菌吸管分別加入巳煮沸滅菌的1%苯胺藍水溶液1 ml及1%玫瑰紅酸溶液 （溶于8.0
g/L氫氧化鈉液中）1ml,混合均勻。如培養物中雜菌不多，則不加玫瑰紅酸亦
可。加熱溶解前，加入1.2%?1.5%瓊脂可制成固體培養基。也可選用市售成品培養基。配
制好的培養基避光、干燥保存，必要時在5°C±3°C冰箱中保存，分裝到平皿中的培養基可
保存2?4周。配制好的培養基不能進行多次融化操作，以少量勤配為宜。當培養基顏色變 化，或脫水明顯時應廢棄不用。
?
