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    瘧原蟲形態學觀察實驗

    2020.8.24
    實驗方法原理人體瘧原蟲有四種,即間日瘧原蟲(P.vivax),三日瘧原蟲(P. malariae),惡性瘧原蟲(P. falciparum)及卵形瘧原蟲(P. ovale)。間日瘧原蟲及惡性瘧原蟲較多見,三日瘧原蟲及卵形瘧原蟲較少見和罕見。瘧原蟲需要兩個宿主才能完成其生活史,在人體內進行裂體增殖,包括紅細胞外期、紅細胞內期,在蚊體內進行配子生殖和孢子生殖。

    一、間日瘧原蟲薄血膜染色標本 (Thin Blood Smears of Plasmodium vivax )

    間日瘧患者血涂片,瑞一姬氏染色,鏡下觀察。 先在低倍鏡下確定血膜平面,血涂片薄而均勻或紅細胞呈單層均勻排列的部位(通常為血片近末端),加油后,轉油鏡觀察。在紅細胞內找瘧原蟲,經瑞一姬氏染色后,瘧原蟲的細胞質染成藍色,細胞核染成紅色、瘧色素(malarial pigment)為黃褐色。注意與血片中的其他細胞、染料渣等區別。

    1.環狀體(Ring form)? 此期被寄生的紅細胞尚無改變。瘧原蟲的細胞質呈環狀,紅色的核為點狀,在環的一邊,很象一個寶石戒指。環狀體的大小約占紅細胞直徑的l/3~l/4左右。

    2.大滋養體(Large trophozoite)? 環狀體進一步發育的形態,此時被寄生的紅細胞脹大,色較淡,紅細胞上常有許多紅色小點即薛氏小點(Schuffner’s dots)。原蟲的細胞質增多有偽足伸出。紅色的核也顯著增大,細胞質上有黃褐色的瘧色素顆粒。

    3.裂殖體(Schizont)? 有未成熟與成熟兩種形態。此時細胞質較致密,偽足已消失,核先分裂,然后細胞質分裂,未成熟裂殖體(unmature schizont)的核尚未分裂到一定數目,細胞質尚未分開。成熟裂殖體(mature schizont)的核已分裂到一定數目即12~24個(平均16個),細胞質圍繞每一個細胞核形成裂殖子。此時黃褐色的瘧色素顆粒集中在蟲體中央或一側。

    4.配子體(gametocyte)? 經過3~5代裂體增殖后,有一部分裂殖子侵入紅細胞后發育為配子體。此時被寄生的紅細胞脹大。雌雄配子體均呈圓形,瘧色素顆粒則均勻地分布在細胞質中。雌配子體(macrogametocyte)的核與細胞質均較致密,染色后細胞質為蘭色,核為紅色偏于一邊,即為核小、致密、在一邊。雄配子體(microgametocyte)核與細胞質較疏松,核較大,位近中央,即為核大、疏松、在中央。


    圖一、Fig. 1:正常紅細胞 Normal red cell; Figs. 2-6:小滋養體 Young trophozoites (ring stage parasites);Figs. 7-18: 大滋養體Trophozoites;Figs. 19-27: 裂殖體Schizonts;(19-22 unmature schizont;23-27 mature schizont) Figs.28 and 29:雌配子體 Macrogametocytes (female);Fig. 30: 雄配子體 Microgametocyte (male).

    二惡性瘧原蟲薄血膜染色標本(Thin Blood Smears of Plasmodium falciparum)

    觀察方法與間日瘧原蟲標本相同。環狀體較間日瘧的小,占紅細胞的1/6左右。環小,常在一個環上有一個細胞核,有的環狀體貼于紅細胞邊緣,尤如飛鳥狀。一個紅細胞內常可見二個或更多的惡性瘧原蟲環狀體。惡性瘧原蟲的大滋養體與裂殖體在周圍血液中一般不易查見。配子體所寄生的紅細胞常被脹破而不見。雌配子體呈新月形,兩端較尖。雄配子體呈臘腸形,兩端較圓。細胞核都在蟲體中央,核的周圍有瘧色素顆粒。


    圖二、 1: 正常紅細胞Normal red cell;Figs. 2-18:滋養體Trophozoites (among these, Figs. 2-10 correspond to ring-stage trophozoites); Figs. 19-26: 裂殖體Schizonts (Fig. 26 is a ruptured schizont); Figs. 27, 28:雌配子體 macrogametocytes (female); Figs. 29, 30: 雄配子體 microgametocytes (male).

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