細菌抗體檢測的操作方法
1.直接凝集試驗
(1)抗原或抗體的定性檢測:根據凝集現象出現與否判斷抗原和抗體是否特異性對應,常采用玻片凝集試驗。將紅細胞懸液、細菌等顆粒性抗原直接滴加在玻片上,再滴加相應抗體與之混勻,室溫下反應數分鐘,用肉眼或低倍鏡觀察,出現顆粒凝集為陽性反應,若抗原抗體不對應則無凝集塊出現,即為陰性。陽性者需用試管凝集試驗測定其效價。
(2)抗體效價的半定量檢測:常采用試管凝集試驗。以標準定量的已知顆粒性抗原與一系列倍比稀釋的免疫血清或患者待檢血清混合,靜置37℃孵育,根據凝集現象的出現判斷血清中有無相應的抗體,并以產生明顯凝集現象的血清最高稀釋度作為抗體效價,因電解質濃度和酸堿度不適當可能引起診斷抗原的非特異性凝集,出現假陽性,故必須設不加抗體的稀釋液作為對照。
2.沉淀試驗
將制備好的抗原懸液與患者血清混合,如產生沉淀,說明被檢者血清中含有相應抗體。
3.酶聯免疫吸附試驗
將制備的抗原懸液進行包被、洗滌、封閉、稀釋、加樣、再洗滌、加酶等一系列步驟后,可檢測出此抗原相應的抗體。
除上述方法外,中和試驗、補體結合試驗、間接免疫熒光技術、乳膠凝集試驗等亦可用于臨床細菌抗體檢測。
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