志賀氏菌血清學鑒定方法!
挑取5%羊血瓊脂平板上的菌落,進行志賀氏菌的血清學鑒定,設鹽水對照。
一、表面抗原(K抗原)
在新分離的某些菌株菌體表面含有此種抗原。不耐熱,加熱100℃1小時即被破壞。具有此種抗原的菌株,可阻止菌體抗原與相應免疫血清發生凝集。
二、菌體(0)抗原
1、型特異性抗原:化學組成為多糖,是光滑型菌株所含有的重要抗原。當菌株變為粗糙型時,此抗原也常隨之消失,根據所含的型抗原不同,可將志賀菌屬分為A、B、C、D四個群及39個抗原型。
2、群特異性抗原:為光滑型菌株的次要抗原,也是菌體抗原的一種。特異性較低,主要存在于B群。根據所含的群抗原不同,可將一些菌型分為多種亞型。
人們原來的認識認為血清學試驗是特異性的,但是志賀氏菌的 O抗原和大腸埃希氏菌屬關系密切,有半數的菌型與大腸埃希氏菌的某些O抗原完全相同。相同抗原菌屬間存在血清交叉凝集反應。因此,生化試驗對于屬的鑒定是非常重要的。
三、抗原的準備
志賀氏菌屬沒有動力,所以沒有鞭毛抗原。
抗原構造與分型:志賀氏菌屬細菌的抗原結構由菌體抗原(O)及表面抗原(K)組成。
O抗原為糖脂蛋白復合物,可分為型特異性抗原和群特異性抗原。志賀氏菌分為4個群,48個血清型(包括亞型及變種)。K抗原在志賀菌屬分類上無意義。
先用四種志賀氏菌多價血清檢查,如果呈現凝集,則再用相應各群多價血清分別試驗。先用B群福氏志賀氏菌多價血清進行實驗,如呈現凝集,再用其群和型因子血清分別檢查,福氏志賀氏菌各型和亞型的型抗原和群抗原鑒別見表4。如果B群多價血清不凝集,則用D群宋內氏志賀氏菌血清進行實驗,如呈現凝集,則用其Ⅰ相和Ⅱ相血清檢查;如果B、D群多價血清都不凝集,則用A群痢疾志賀氏菌多價血清及1~12各型因子血清檢查,如果上述三種多價血清都不凝集,可用C群鮑氏志賀氏菌多價檢查,并進一步用1~18
四、各型因子血清檢查
刮取5%羊血瓊脂平板上的單個菌落,進行系統生化鑒定。
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