可用于免疫沉淀的抗體類型和特點介紹
有3種類型的抗體可用于免疫沉淀:多克隆抗體,混合單克隆抗體和單克隆抗體。
多克隆抗體 | 混合單克隆抗體 | 單克隆抗體 |
反應強度極好 | 抗體依賴性(極差到極好)極好 | |
特異性一般良好(有時本底高) | 極好,但有些出現交叉反應 | 極好,避免使用有交叉反應的抗體 |
優點穩定,多價反應特異 | 供應不受限制穩定,多價反應特異 | 供應不受限制 |
缺點本底不易清除 | 需對抗原有高親和力 | 供應不普遍 |
多抗的本底較高,可通過滴定產生免疫沉淀所需的抗血清量,來有效地清除某些非特異性本底。其方法是將特異性抗體降低到能定量結合抗原的最低滴度,使本底保持最低。
免疫沉淀要求抗原的純度盡可能提高。降低本底,用不與待檢抗原結合的非特異性抗體預處理,可以從抗原溶液中除去非特異性結合蛋白,即此法第一次是用非免疫抗體降低本底,第二次再用所研究的抗體,這樣進行二次免疫沉淀是達到純化免疫沉淀物最有效的方法。
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