原代細胞分離和培養基本步驟
?1、器官和組織的選擇
??? 盡可能的去除不必要的組織和血跡。
??? 2、原代細胞的分離
??? （1）應用PriCells原代細胞分離試劑盒I、II、III。
??? （2）根據組織來源不同，可選用不同的PriCells原代細胞分離試劑盒。
??? 3、原代細胞的培養：
??? （1）PriCells原代細胞特制培養基
??? （2）PriCells原代細胞特制添加物
??? （3）優質胎牛血清
??? 4、細胞的培養和鑒定：
??? PriCells原代細胞鑒定試劑盒
??? 4、原代細胞的傳代、保存
??? （1）傳代：依椐細胞的生長狀態，生長的細胞1：2或1：3進行傳代。
??? （2）保存：DMSO＋培養液＋血清
??? 按下列順序降溫：室溫→4℃（20分鐘）→冰箱冷凍室（30分鐘）→超低溫冰箱（－80℃? 過夜）→液氮。
??? 5、原代細胞的復蘇
??? （1）取出細胞，迅速放入37℃溫水中快速解凍。
??? （2）吸出細胞懸液，并加10倍以上培養液。
??? （3）用培養液適當稀釋后接種培養瓶，放入37℃ CO2培養箱靜置培養。
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