如何溫和地消化細胞減少損失？
細胞的生命極其脆弱
消化一定程度上是對它們的一種折磨
所以做好細胞消化
善待你的細胞們
一些細節要注意
在使用胰酶（Trypsins）細胞消化液的過程中要特別注意避免消化液被細菌污染。
胰酶細胞消化液消化細胞時間不宜過長，否則細胞鋪板后生長狀況會較差，做流式時的CD Marker 也可能會下降。
細胞消化心得
對大部分細胞消化來說，可以在消化到差不多快要脫落的時候，移除大部分胰酶，然后直接加新鮮的培養基將細胞吹打下來，省去離心步驟。殘余的胰酶含量很低，所以不會對細胞產生任何影響。
對于難消化的細胞，如HCT15, LS411和KM12，用不含Ca2+，Mg2+的PBS洗滌一次后，加入稍微多一點胰酶，置37oC徹底消化(一般為幾分鐘)至脫落（一晃細胞就掉下來），然后再加培養基終止胰酶反應、離心 (若是無血清培養基，需改加胰酶抑制劑)。這么做的道理是，細胞消化不徹底，勢必會增加吹打輔助脫落的次數，而吹打次數越多，細胞活性越差。
正確選擇細胞消化試劑
BI提供動物來源的傳統胰酶及基因工程生產的重組胰蛋白酶。
動物胰酶普遍用于血清培養，不同的細胞加入胰酶的成分和濃度不一樣。貼壁不牢和半貼壁細胞盡量使用濃度0.05%不含EDTA的胰酶且不需要放在培養箱孵育，這樣易于控制，對細胞的傷害也降到最低。對于難消化的細胞就需要使用含EDTA的0.25%的胰酶，而不是無限的延長消化時間。
EDTA有什么作用呢？許多人不用胰酶，只用EDTA，或者用胰酶/EDTA聯合作用。胰酶切割ECM負責粘連和附著的蛋白，而EDTA通過螯合Ca2+，抑制Integrin的貼壁活性，所以EDTA的作用更加溫和。
重組胰酶用于無血清培養。重組胰酶具有與動物源性胰蛋白酶相同的酶學性質，但是不含任何動物源成分，可替代胰蛋白酶使用。
BI生產的重組胰酶Recombinant?Trypsin EDTA Solution?，堪稱傳統胰酶的完美替代者。無雜酶，無外源性或內源性病毒污染，無PMSF、EDTA等任何蛋白酶抑制劑，較傳統的胰酶使用方便，在細胞培養實驗中減少了很多不必要的操作，細胞培養效果大大提高了。
? ? ? ? ? ? ? ? ??
BI ?Trypsin EDTA Solution A? ? ? ? ? ? ? ? ? ?BI?Recombinant?TrypsinEDTA? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ??
-
綜述
