血型與輸血概述(四)
(四)孟買型
極少數人基因型為hh表型為Oh由于沒有H基因,而h基因又為無效基因,因此其中紅細胞上和唾液中不可能有H物質,因而也就不存在A、B抗原體,所經Oh紅細胞不被抗A、抗B或抗A、B所凝集,但其血清中抗A抗B與抗H,所經除與A、B型紅細胞均能產生強反應外,還可與O型紅細胞凝集,當懷疑Oh時,如其血清與O型紅細胞凝集,可經確定其為Oh型。Oh型在孟買被首次發現,故又稱孟買型。用荊豆提取的植物凝集素養抗H可以鑒別Oh型與O型,這種抗H可以與O型紅細胞發生強凝集,卻不能與Oh紅細胞凝集,如用已知Oh血清鑒定Oh紅細胞則更好。
此外還有類孟買表現型Ah及Bh。此兩類血型的紅細胞上缺乏血清學足以檢查出的H抗原,但卻有少量A、B抗原,其紅細胞可以分別與抗A和B抗發生很弱的凝集。類孟買表現型是變H基因,中們生析少量H抗原,而所有H抗原皆被基順A與基因B轉變成抗原A與抗原B。Ah 血清中A或抗B外,還含有抗H。由于孟買型及類孟買型極其少見,所以當需要輸時,選擇同型的供血者是非常困難的。
(五)ABO血鑒定
通常用鹽水凝集法檢測紅細胞上存在的血型抗原,以及血清中存在的血型抗體,依據抗原體存在的情況判斷血型。常規的方法包括正向定型與反向定型,前者是用已知抗體特異性的血清上抗原紅細胞的抗原,后者是用已知血型的紅細胞檢查血清中抗體,凡出現凝集者為陽性,紅細胞呈散在游離狀態為陰性,所用抗A、抗B和抗A、B標準血清均采自健康人,并應符合下述條件:①高度特異只能與相應的紅細胞抗原發生凝集,無非特異性凝集;②抗A血清效價在1:128以上,抗B血清效價在1:64以上;③親和力要求抗體和抗原發生反應的速度應在兩者相加后15秒內出現凝集,其強度為3分鐘時凝塊不小于1mm2;④冷凝集素效價在1:4以下。
表4-8 紅細胞的常規ABO定型
正向定型 | 反向定型 | 判讀結果 | ||||
抗A | 抗B 抗A,B | A 細胞 B細胞 O細胞 | ||||
- | - | - | + | + | - | O |
+ | - | + | - | + | - | A |
- | + | + | + | - | - | B |
+ | + | + | - | - | - | AB |
試驗方法有玻片法與試管法兩種。玻片法操作簡單,適于大量標本檢查。試管法由于離心作用可加速凝集反應,適于急診檢查,反向定性不宜采用玻片法,因為如果被檢查者血清抗體效價低時不易與紅細胞凝集,而借助于離心力可以使用紅細胞接觸緊密,促進凝集的發生,必要時可在反向定型中加O型紅細胞,有利于檢查孟買型的抗H抗體。
亞型紅細胞抗原性弱,如抗A抗B標準血清效價低時,易造成漏或誤定,如抗A血清將近價低時,可將A或A2B紅細胞誤定為O或B型,如加用O型血肖和反向定型,可避免此類錯誤。當需要區分A1與A2型時,需用抗A1抗體。ABO亞型的血清學特征見表4-9。
表4-9 ABO血型的血清學特點
表現型 | 用已知試劑血清檢查紅細胞 ? 抗A 抗A1?抗B 抗A,B 抗H |
用已知試劑紅細胞檢查血清 ? A1?A2?B?O |
吸收放散 | 分泌物中血型物質 | |||||||
A1 | + | + | - | + | - | - | - | + | - | A | A,H |
Aint | + | W+ | - | + | W+ | - | - | + | - | A | A,H |
A2 | + | _ | - | + | + | 棧-+(1%) | - | + | - | A | A,H |
A3 | Mf | - | - | Mf | + | 棧-+(20%) | - | + | - | A | A,H |
Abantu | Mf | - | - | Mf | + | + | - | + | - | A | H |
Abend | + | - | - | W+ | + | - | - | + | - | A | H |
Ael | - | - | - | - | + | - | - | + | - | A | H |
Ax | - | - | _ | + | + | + | + | + | - | A | H |
Am | w+ | w | _ | w+ | + | - | - | + | - | A | A,H |
B | - | - | + | + | - | + | + | - | - | B | B,H |
B5 | - | - | Mf | Mf | + | + | + | - | - | B | B,H |
Bx | - | - | Vw+ | W+ | + | + | + | - | - | B | H |
Bm | - | - | - | Vw+ | + | + | + | - | - | B | B,H |
O | - | - | - | - | + | + | + | + | - | H | H |
Oh | - | - | - | - | - | + | + | + | + | ? | - |
(注:vw+為極弱凝集;w+為凝集;mf為混合外觀凝集;伴有大量游離細胞;Oh為孟買型。)
ABO血型鑒定準確是十分重要的,鑒定錯誤可以引起嚴重后果,造成鑒定結果錯誤或正反向定型不符的原因很多,可以有技術問題或ABO血型本身的問題,賂血型的問題大致有下列原因:
1.患者未產生ABO抗體或抗體被抑制這種情況可見于:① 新生兒,4-6個月內嬰兒反向定型時可能不凝集或凝集很弱,且新生兒抗體多來自母親,故反向定型意義不大;②隨年齡增長老年人抗體水平逐漸下降;③白血病、淋巴瘤以及使用免疫抑制藥患者;④先天性丙種球蛋白缺乏癥;⑤骨髓移植患者等。
2.被檢查紅細胞異常①弱A或弱B亞型;②白血病時可使A或B抗原減弱,而誤定為O型;③霍奇金病也有類似的白血病的情況;④獲得性B或獲得性A表現等。
3.被檢查者血漿分異常:①某些疾病如多發性骨髓瘤、霍金肉瘤時,可使用血漿纖維蛋白原水平升高易形成淺串狀物,外觀類似凝集;②應用血漿擴容劑如低分子右旋糖酐,聚乙烯吡咯酮,也能引起錢串狀假凝集;③有些疾病如胃癌、胰腺癌等,血漿可有過多的可溶性血型物質,中和了試劑中抗A或抗B。
雖然從遺傳的角度看,一生中血型是不會改變,但某些疾病可以干抗原體的表現,而影響測定結果,應加以注意。除上述屬于血型問題測定結果以外,實驗操作等也是一個重要方面,常造成錯誤,此點將在實驗指導書中論及。